Diferența cheie – HPLC vs HPTLC
Diferența cheie dintre HPLC și HPTLC este că HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă, în timp ce HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă.
Cromatografia este o metodă de separare fizică care este utilizată pentru a separa și identifica componentele dintr-un amestec. Atât HPLC cât și HPTLC sunt tehnici cromatografice. HPLC este cromatografia lichidă de în altă performanță. HPTLC este cromatografie în strat subțire de în altă performanță.
Ce este HPLC?
HPLC este cromatografia lichidă de în altă performanță. Este o tehnică analitică utilizată pentru separarea, identificarea și cuantificarea componentelor dintr-un amestec. În această tehnică, proba este dizolvată într-un solvent adecvat. Apoi solventul cu proba este trecut printr-o pompă cu o presiune dată. Pompa este umplută cu material adsorbant solid. Apoi, unele componente se leagă puternic de materialul absorbant, în timp ce alte componente se leagă slab. Acest lucru face ca componentele să aibă debite diferite prin pompă. Prin urmare, componentele pot fi separate cu ușurință.
Figura 01: Un sistem HPLC
Materialul adsorbant care umple pompa este cunoscut sub numele de fază staționară. Solventul cu proba dizolvată este cunoscut ca fază mobilă. Pompa folosită în această tehnică se numește coloană. Coloana este umplută cu un material adsorbant, cel mai frecvent, particule de silice. Dimensiunea acestor particule poate varia între 2-50 μm. Procesul de separare este afectat de compoziția fazei mobile și de temperatura sistemului. Interacțiunile dintre faza staționară și componenta din probă pot fi interacțiuni hidrofobe, interacțiuni dipol-dipol, legături ionice etc.
Presiunea de funcționare a HPLC este considerabil mai mare decât cea a cromatografiei lichide tradiționale. Este în jur de 50-350 bar. Diferența dintre cromatografia lichidă și HPLC este că, în cromatografia lichidă, proba cade prin coloană sub gravitație, în timp ce, în HPLC, proba este presurizată prin coloană. Dimensiunea coloanei și a particulelor absorbante sunt, de asemenea, foarte mici în comparație cu cromatografia lichidă tradițională. Cu toate acestea, rezoluția dată de tehnica HPLC este superioară.
Ce este HPTLC?
HPTLC este cromatografia în strat subțire de în altă performanță. Este forma avansată și automată a TLC tradițional. Această tehnică oferă o rezoluție eficientă într-o perioadă scurtă de timp. În această metodă de analiză, proba și o referință pot fi analizate în același timp, ceea ce permite compararea probei cu referința. Oferă o precizie analitică îmbunătățită decât alte tehnici cromatografice. Timpul necesar analizei este mai mic. Tehnica este o tehnică cu costuri reduse.
Figura 02: O analiză a coloranților alimentari folosind HPTLC
Metoda HPTLC este un proces simplu, iar etapa de pregătire a probei este, de asemenea, eliminată (În TLC tradițională, etapa de pregătire a probei este inclusă înainte de separare. Această etapă implică curățarea și îmbogățirea). Solventul poate fi utilizat direct fără nicio pre-tratare, deși alte tehnici cromatografice necesită pre-tratări, cum ar fi degazarea, filtrarea etc.
Materialul adsorbant utilizat în HPTLC este silice cu particule de dimensiuni foarte mici. În TLC tradițională, dimensiunea particulelor de silice este de 5-20 μm, în timp ce, în HPTLC, este de 4-8 μm. Proba este aplicată pe placa HPTLC folosind un aplicator. Oferă o aplicare uniformă și sigură. Apoi plăcile sunt plasate într-o cameră având faza mobilă. Camera trebuie să fie saturată cu vaporii fazei mobile. După procesul HPTLC, petele care s-au mutat pot fi detectate. La detectarea petelor de pe placă, tehnica HPTLC utilizează o regiune UV adecvată sau o cameră de iod.
Care este diferența dintre HPLC și HPTLC?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC este cromatografia lichidă de în altă performanță. | HPTLC este cromatografia în strat subțire de în altă performanță. |
| Tehnica | |
| În HPLC, faza mobilă cu solventul este trecută printr-o coloană umplută cu faza staționară. | În HPTLC, proba este localizată pe o placă TLC și este plasată în interiorul unei camere care conține faza mobilă; apoi eșantionul este lăsat să migreze în sus pe placă împreună cu faza mobilă. |
| Măsurare | |
| În HPLC, diferențele dintre debitele componentelor prin coloană sunt folosite pentru a separa componentele din probă. | În HPTLC, diferențele dintre distanțele parcurse de fiecare componentă din eșantion sunt folosite pentru a separa componentele din eșantion. |
| Separare cantitativă | |
| HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă. | HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă. |
Rezumat – HPLC vs HPTLC
HPLC și HPTLC sunt două tehnici cromatografice. Diferența cheie dintre HPLC și HPTLC este că HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă, în timp ce HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă.
