Diferența cheie dintre enzimele de restricție EcoRI și HindIII este că EcoRI este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din E. coli, în timp ce HindIII este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din Haemophilus influenza.
Enzima de restricție sau endonucleaza de restricție este o enzimă care scindează ADN-ul în fragmente la anumite locuri de recunoaștere (loturi de restricție) din molecula de ADN. Aceste enzime de restricție se găsesc în bacterii și arhee. Ele oferă un mecanism de apărare împotriva virusurilor invadatoare. Enzimele de restricție sunt, în general, clasificate în cinci tipuri diferite: tip I, tip II, tip III, IV și tip V. EcoRI și HindIII sunt două enzime de restricție care aparțin grupului de enzime de restricție de tip II.
Ce sunt enzimele de restricție EcoRI?
EcoRI este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din speciile E.coli. Este o enzimă de restricție care scindează duble elice ale ADN-ului în fragmente în locuri specifice. EcoRI este, de asemenea, o parte a sistemului de restricție-modificare. EcoRI a fost prima enzimă care a fost inițial izolată din tulpina RY13 a speciei E. coli. Este folosit ca enzimă de restricție în biologia moleculară. EcoRI creează 4 capete lipicioase de nucleotide cu protuberanțe de 5’ ale AATT. EcoRI taie ADN-ul la secvența de recunoaștere specifică G↓AATTC. Are secvența complementară palindromică a CTTAA↓G. Mai mult, această enzimă de restricție aparține subclasei P de tip II (specificitate palindromică). În structura sa primară, EcoRI conține motivul PD. D/EXK în situl său activ, ca multe alte enzime de restricție.
Figura 01: EcoRI
Enzima de restricție EcoRI este un homodimer de 31 kDa. Conține un domeniu globular al arhitecturii α/β. Fiecare subunitate conține o buclă care iese din domeniul globular și se înfășoară în jurul ADN-ului atunci când este legată. Această enzimă poate fi cocristalizată cu secvența pe care o taie în mod normal. În plus, enzima de restricție EcoRI este utilizată într-o mare varietate de tehnici genetice moleculare, inclusiv clonarea, screening-ul ADN-ului și secțiunile de ștergere a condițiilor in vitro ale ADN-ului.
Ce sunt enzimele de restricție HindIII?
HindIII este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din speciile Haemophilus influenza. El scindează secvența palindromică de ADN AACCTT în prezența cofactorului Mg2+ prin hidroliză. Scindarea acestei secvențe particulare între AA’S (5’A↓ACCTT3’ și 3’TTCGA↓A5’) are ca rezultat supraîncărcări de 5’ pe molecula de ADN numite capete lipicioase. Această enzimă se găsește în organismele procariote precum bacteriile. Bacteriile folosesc această enzimă ca mecanism de apărare împotriva virușilor precum bacteriofagii.
Figura 02: HindIII
Din punct de vedere structural, HindIII este un homodimer. Conține un miez structural comun care cuprinde patru foi β și o singură elice α, ca și alte tipuri de enzime de restricție II. Masa moleculară a acestei enzime este de 34,9 kDa. Mai mult, HindIII este foarte util în experimentele moderne de biologie moleculară, cum ar fi secvențierea și cartografierea ADN-ului.
Care sunt asemănările dintre enzimele de restricție EcoRI și HindIII?
- EcoRI și HindIII sunt două enzime de restricție aparținând grupului de enzime de restricție de tip II.
- EcoRI și HindIII au fost găsite la începutul anilor 1970.
- EcoRI și HindIII conțin ambele motivul secvenței de aminoacizi PD.. D/EXK.
- Ambele enzime de restricție efectuează scindare foarte specifică a ADN-ului.
- Aceste enzime de restricție au nevoie de Mg2+ ca cofactor pentru activitatea lor specifică.
- Produc capete lipicioase după tăierea ADN-ului.
- Sunt componente foarte utile în cercetarea biologică moleculară modernă.
Care este diferența dintre enzimele de restricție EcoRI și HindIII?
EcoRI este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din speciile E.coli, în timp ce HindIII este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din speciile Haemophilus influenza. Astfel, aceasta este diferența cheie dintre EcoRI și HindIII. Mai mult, EcoRI taie ADN-ul la secvența de recunoaștere specifică G↓AATTC, în timp ce HindIII taie ADN-ul la secvența de recunoaștere specifică A↓ACCTT.
Infograficul de mai jos prezintă diferențele dintre EcoRI și HindIII în formă tabelară pentru comparare una lângă alta.
Rezumat – Enzimele de restricție EcoRI vs HindIII
EcoRI și HindIII sunt două enzime de restricție care aparțin subclasei p de tip II. Ei efectuează o scindare foarte specifică a ADN-ului. EcoRI este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din speciile E.coli, în timp ce HindIII este o enzimă de restricție de tip II care este izolată din speciile Haemophilus influenza. Deci, aceasta rezumă diferența dintre EcoRI și HindIII.
