Diferența cheie – Colorarea Gram vs Cultura
Cotația Gram este o tehnică de colorare care este efectuată pentru a diferenția bacteriile în două grupuri în funcție de grosimea stratului de peptidoglican din peretele lor celular. Cultura este o metodă de creștere și menținere a microorganismelor în condiții de laborator pentru diferite analize. Diferența cheie dintre colorarea gramelor și cultura este funcția lor; tulpină gram o tehnică de colorare a bacteriilor în care cultura este o metodă de creștere și întreținere a microorganismelor.
Ce este pata Gram?
Cotația Gram este o tehnică importantă de colorare diferențială utilizată pentru identificarea bacteriilor în Microbiologie. Această tehnică a fost introdusă de bacteriologul danez Hans Christian Gram în 1884. Colorația Gram clasifică bacteriile în două grupe majore: gram pozitive și gram negative; acestea sunt foarte importante în clasificarea și identificarea bacteriilor. Colorația Gram este efectuată ca pas inițial pentru caracterizarea bacteriilor.
Bacterii sunt grupate în funcție de diferențele dintre peretele lor celular. Bacteriile Gram pozitive conțin un strat gros de peptidoglican în peretele lor celular, în timp ce bacteriile Gram negative conțin un strat subțire de peptidoglican în peretele lor celular, așa cum se arată în figura 01. Rezultatul colorației Gram se va baza pe diferența de grosime a stratului de peptidoglican al celulei. peretele celular.
Figura 1: bacterii Gram pozitive și bacterii Gram negative
Colorarea Grams se realizează folosind patru reactivi diferiți și anume; colorant primar, mordant, agent de decolorare și contrapată. Violet cristal și safranina servesc ca pete primare și respectiv contra, în timp ce gramele de iod și 95% alcool servesc ca mordant și respectiv decolorant.
Pași de bază ale colorației Gram
- Se prepară un frotiu bacterian pe o lamă de sticlă curată, se fixează la căldură și se răcește.
- Frotiul este inundat cu cristal violet timp de 1 – 2 minute.
- Frotiul se clătește cu apă curentă de la robinet pentru a îndepărta petele în exces.
- Grame de iod se aplică pe frotiu timp de 1 minut.
- Frotiul se clătește cu apă curentă de la robinet
- Frotiul se spală cu alcool 95% timp de 2 – 5 secunde și se clătește cu apă curentă de la robinet.
- Frotiul este colorat în contra cu safranină timp de 1 minut
- Frotiul se clătește cu apă curentă de la robinet, se usucă și se observă la microscop.
La sfârșitul colorației Gram, bacteriile Gram negative vor fi observate în culoarea roz, în timp ce bacteriile Gram pozitive vor fi observate în culoarea violet, așa cum se arată în Figura 02. Rezultatul colorației Gram este decis de grosime. a stratului de peptidoglican din peretele lor celular. În timpul etapei de decolorare, pata primară și mordantul sunt îndepărtate cu ușurință din bacteriile gram negative și devin incolore, deoarece au un strat subțire de peptidoglican. Pata primară este reținută în bacteriile gram pozitive, deoarece acestea au un strat gros de peptidoglican. Contrapata nu va fi eficientă pentru bacteriile gram pozitive din cauza reținerii petei primare. Deci, bacteriile gram pozitive vor fi vizibile în culoarea primară a petei, adică în culoarea violet. Contrapata va păta bacteriile Gram negative și va fi vizibilă în culoarea alegerii, care este culoarea safraninei. Prin urmare, este ușor să clasificați bacteriile în două grupuri după colorația Gram și este valoroasă în diferențierea și identificarea bacteriilor.
Figura 2: Tulpina Gram
Ce este cultura?
Cultura microbiană este o metodă de cultivare și menținere a microorganismelor în condiții de laborator pentru diferite scopuri. Culturile sunt crescute în medii solide, semisolide și lichide în funcție de tipul și scopul cultivării microorganismelor. Culturile sunt furnizate cu nutrienții necesari și condițiile de creștere cerute de microorganisme. Există diferite componente ale unui mediu de cultură, cum ar fi sursa de energie, sursa de carbon, sursa de azot, minerale, micronutrienți, apă, agent de solidificare etc. Temperatura optimă, oxigenul și pH-ul trebuie ajustate în funcție de tipul de microorganism crescut.
Există diferite tipuri de culturi microbiene; de exemplu, cultură discontinuă, cultură continuă, cultură prin înjunghiere, cultură în plăci de agar, cultură în bulion etc. În funcție de compoziția mediului de creștere, există diferite tipuri de medii de cultură cunoscute ca medii sintetice, medii semisintetice și medii naturale. Culturile microbiene sunt preparate în condiții sterile într-o cameră specială numită flux de aer laminar. Mediul de creștere și sticlăria sunt sterilizate înainte de inocularea microorganismului dorit. În condiții sterile adecvate, microorganismul țintă este transferat în mediul nutritiv sterilizat și incubat la temperatură optimă. În interiorul mediului, microorganismul va crește și se va multiplica folosind nutrienții furnizați.
Figura 3: O cultură bacteriană pe placă
Care este diferența dintre colorația Gram și Cultură?
Pata Gram vs Cultura |
|
| Tulpina Grams este o tehnică de colorare diferențială utilizată pentru diferențierea și identificarea bacteriilor. | Cultura microbiană este o metodă de creștere a microorganismelor în laborator. |
| Componente | |
| Acest lucru folosește diferiți reactivi, inclusiv două colorante. | Acest lucru folosește medii de cultură diferite, cum ar fi medii solide, semisolide și lichide compuse din nutrienți și alte condiții necesare. |
| Funcții de bază | |
| Acest lucru permite gruparea bacteriilor în două grupuri: gram negative și grame pozitive. | Acest lucru permite multiplicarea microorganismelor în diferite scopuri. |
| Baza | |
| Rezultatul colorației Gram se bazează pe diferențele dintre stratul de peptidoglican al peretelui celular. | Microorganismele vor crește și se vor multiplica în mediul de cultură. |
| Rezultat | |
| Bacterii Gram negative sunt vizibile în culoarea roz, iar bacteriile Gram pozitive sunt vizibile în culoarea violet. | Pe farfurii pot fi observate colonii de microorganisme. Pe medii lichide, microorganismele sunt în formă suspendată. |
Rezumat – Colorarea Gram vs Cultura
Culturile microbiene sunt preparate și menținute în condiții de laborator pentru diferite scopuri, cum ar fi depozitarea, testarea, purificarea chimică etc. Colorația Gram este o procedură de colorare care diferențiază bacteriile în două grupe principale numite bacterii gram negative și bacterii gram pozitive. Prin urmare, diferența dintre colorația cu grame și cultură este că colorarea cu grame este o tehnică de colorare a bacteriilor, în timp ce cultura este o metodă de creștere și menținere a microorganismelor în laboratoare.
