Diferența cheie dintre hibridul de drojdie 1 și hibridul de drojdie 2 este că hibridul de drojdie 1 este un test bazat in vitro pentru a analiza interacțiunile ADN-proteină, în timp ce hibridul de drojdie 2 este un test bazat in vitro pentru a analiza interacțiunile proteină-proteină.
Studiarea interacțiunilor dintre moleculele celulare poate ajuta la definirea site-urilor de recunoaștere implicate în expresia genelor și în căile proteice. Interacțiunile ADN și proteine sunt parte integrantă a proceselor celulare, cum ar fi modificările ADN și reglarea transcripțională, etc. Pe de altă parte, interacțiunile proteinelor și proteinelor joacă un rol vital în procesele celulare, cum ar fi replicarea, transcripția, translația și transducția semnalului. Prin urmare, este extrem de important să se identifice aceste interacțiuni ale moleculelor celulare prin diferite teste. Un hibrid de drojdie și un hibrid de drojdie sunt două teste in vitro pentru a analiza interacțiunile ADN-proteină și proteină-proteină.
Ce este Yeast One Hybrid?
Yeast one hybrid (Y1H) este un test in vitro pentru a analiza interacțiunile ADN-proteine intracelulare. Această metodă a fost stabilită pentru prima dată de Wang și Reed în 1993. De atunci, a demonstrat o putere mai mare în cercetarea biologică. În acest test, există două componente principale: momeală ADN și pradă proteică.
Figura 01: Hibrid Yeast One
În procedură, o secvență de ADN (momeală ADN) este mai întâi donată în amonte de doi reporteri diferiți (HIS3, LacZ). Aceste constructe reporter sunt integrate în genomul unei tulpini de drojdie. Factorii transcripționali sunt luați ca pradă proteică. Factorii transcripționali sunt fuzionați cu domeniul de activare transcripțional (AD) al factorului transcripțional Gal4 de drojdie pentru a produce proteine hibride. Întreaga proteină hibridă este integrată într-o plasmidă înainte de a o introduce în tulpina de drojdie. După introducerea plasmidei recombinante, când factorul transcripțional interacționează cu fragmentul de ADN, fragmentul AD activează expresia genei reporter (HIS3 sau LacZ). Secvențierea plasmidelor permite identificarea factorului transcripțional care se poate lega la fragmentul de ADN. Recent, metoda hibridă de drojdie a fost folosită pentru a cerceta diagnosticul bolii. Prin urmare, în viitor, acest test va fi utilizat mai pe scară largă în cercetarea științifică și în tratamentele medicale.
Ce este Yeast Two Hybrid?
Hibridul doi de drojdie (Y2H) este un test in vitro pentru a analiza interacțiunile dintre proteine și proteine intracelulare. Această metodă a fost găsită inițial de Stanley Fields și Ok-Kyu Song în 1989. Această tehnică detectează interacțiunile proteină-proteină folosind factorul de transcripție Gal4 al drojdiei.
Figura 02: Hibrid de drojdie doi
În această metodă, două fuziuni (hibrizi) sunt mai întâi construite folosind proteine de interes: fuzionarea unei proteine cu domeniul de legare la ADN (DBD) și prin fuziunea celeil alte proteine cu domeniul activator (AD) al factorului de transcripție Gal4. Proteina fuzionată cu DBD este cunoscută ca momeală, în timp ce proteina fuzionată cu AD este cunoscută ca pradă. În tulpina de drojdie, la interacțiunea dintre momeală și pradă, DBD și AD sunt aduse în imediata apropiere pentru a genera un factor de transcripție funcțional Gal4 în amonte de gena raportor. Factorul de transcripție funcțional activează expresia genei reporter. În plus, această metodă este utilizată în prezent pentru a analiza interacțiunile proteinelor integrale ale membranei din celulele de mamifere.
Care sunt asemănările dintre hibridul de drojdie One și hibridul de drojdie doi?
- Hibridul de drojdie unul și hibridul de drojdie doi sunt două teste in vitro pentru a analiza interacțiunile ADN-proteină și proteină-proteină.
- Aceste teste folosesc tulpini de drojdie.
- Ambele teste folosesc domeniul de activare (AD) al factorului de transcripție Gal4.
- Ei folosesc expresia genei reporter (HIS3 sau LacZ) pentru a detecta interacțiuni.
- Au momeală și pradă.
- Ambele teste sunt foarte utile în cercetarea biologică modernă.
Care este diferența dintre hibridul Yeast One și Yeast Two Hybrid?
Hibridul de drojdie unul este un test bazat in vitro pentru a analiza interacțiunile ADN și proteine, în timp ce hibridul de drojdie doi este un test bazat pe in vitro pentru a analiza interacțiunile dintre proteine și proteine. Astfel, aceasta este diferența cheie dintre un hibrid de drojdie și un hibrid de drojdie. Mai mult, la un hibrid de drojdie, momeala este un fragment de ADN, iar prada este o moleculă de proteină. Pe de altă parte, în hibridul doi drojdii, atât momeala, cât și prada sunt molecule proteice.
Infograficul de mai jos afișează diferențele dintre un hibrid de drojdie și un hibrid de drojdie în formă tabelară pentru o comparație alăturată.
Rezumat – Hibrid Yeast One vs Hibrid Yeast Two
Hibridul de drojdie unul și hibridul de drojdie doi sunt două teste importante bazate pe in vitro. Un hibrid de drojdie este un test bazat in vitro pentru a analiza interacțiunile ADN și proteine, în timp ce hibridul de drojdie doi este un test bazat in vitro pentru a analiza interacțiunile proteinelor și proteinelor. Astfel, aceasta este diferența cheie dintre un hibrid de drojdie și un hibrid de drojdie.
