Diferență cheie – CFU vs MPN
Unitatea formatoare de colonii (CFU) și numărul cel mai probabil (MPN) sunt două metode utilizate pentru a enumera microorganismele din probe. Ambii parametri sunt utilizați pentru a detecta calitatea apei și bacteriile indicator fecale din probele de apă. Unitatea de formare a coloniilor este o măsură utilizată pentru a enumera numărul de celule bacteriene viabile sau celule fungice în volum sau greutate specifică a unei anumite probe. Unitatea standard pentru acest parametru este CFU/ml sau CFU/g. Numărul cel mai probabil este o altă unitate utilizată pentru a măsura numărul de celule bacteriene viabile dintr-o probă lichidă. Diferența cheie dintre CFU și MPN este că CFU este calculată din coloniile bacteriene și fungice care cresc pe o placă de agar solid, în timp ce MPN este calculată din bacterii viabile care cresc într-un mediu lichid.
Ce este CFU?
Unitatea formatoare de colonii (CFU) este un parametru care măsoară numărul de celule viabile bacteriene sau fungice dintr-o anumită probă. Metoda care numără unitățile formatoare de colonii este denumită numărare standard pe plăci. Coloniile viabile care apar pe plăcile de agar sunt exprimate ca UFC per 1 ml (unitate de formare de colonii per mililitru) de probă pentru lichide sau UFC per 1 g (unitate de formare de colonii per un gram) de probă pentru solide.
Există două metode obișnuite utilizate pentru a măsura CFU într-un eșantion. Sunt metoda plăcii de împrăștiere și metoda plăcii de turnare. Aceste două metode sunt susținute de o tehnică numită diluare în serie. Probele diluate în serie permit obținerea unui număr numărabil de colonii pe suprafața agarului. Un volum cunoscut de probă poate fi împrăștiat pe suprafața unei plăci de agar sau amestecat cu agar și turnat pe o placă. Placa este apoi incubată și coloniile rezultate sunt numărate. Numărul de colonii se referă la numărul de microorganisme din proba originală. Plăcile care prezintă prea multe colonii sau prea puține colonii sunt excluse de la numărare deoarece rezultatele pot să nu fie exacte statistic pe acele plăci. Statistic, cel mai bun interval este de 30 – 300 de colonii pe o placă de agar. Prin urmare, plăcile corecte trebuie selectate pentru o enumerare precisă. Se efectuează diluția în serie pentru funcția de mai sus.
Odată ce numărați numărul de colonii viabile de pe plăci, CFU/ml poate fi calculat folosind următoarea ecuație.
CFU per ml de probă originală=numărul de colonii pe o placă X factor de diluție
Factor de diluție=(1/ Diluția plăcii)
De exemplu, dacă obțineți 149 de colonii pe placa de diluție 10-4, atunci numărul de bacterii din 1 ml din proba originală poate fi calculat după cum urmează:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 sau 1490000
=1. 49 x 106
Figura 01: Unitatea de formare a coloniilor
Ce este MPN?
Cel mai probabil număr este o măsură alternativă la CFU/ml. MPN estimează, de asemenea, celulele viabile dintr-o probă lichidă. Ea numără organismele care cresc într-o cultură lichidă și este o tehnică predominant bacteriologică. Această metodă este deosebit de utilă pentru probele care conțin concentrații scăzute de celule bacteriene; de exemplu, lapte, apă potabilă etc. Valoarea MPN este exprimată pentru 100 ml de volum. MPN se bazează pe o metodă statistică bazată pe teoria probabilității. Există tabele statistice concepute pentru a găsi valorile MPN la 100 ml de probă. Aceste tabele arată rezultatele la limite de încredere de 95%.
Valoarea MPN este calculată după efectuarea unei tehnici numite metoda de fermentare în mai multe tuburi. Trei seturi de tuburi care conțin un mediu de cultură adecvat sunt inoculate cu trei volume diferite de probă, cum ar fi 10 ml, 1 ml și 0.1 ml și incubat pentru creștere. După perioada de incubație, tuburile sunt marcate cu + (pozitiv) sau – (negativ) pentru prezența sau absența creșterii. Modelul rezultatelor pozitive și negative este apoi comparat cu un tabel MPN de probabilități statistice pentru a estima numărul de microorganisme. Apoi este dată valoarea MPN pentru 100 ml de probă. MPN este utilizat pe scară largă pentru a detecta bacteriile coliforme prezente în probele de apă.
Figura 02: Tabelul MPN
Care este diferența dintre CFU și MPN?
CFU vs MPN |
|
| CFU este o măsură utilizată pentru a exprima numărul de colonii bacteriene sau fungice viabile dintr-o anumită probă. | MPN este o măsură alternativă la CFU și măsoară numărul de celule bacteriene viabile dintr-o probă lichidă. |
| Unitate | |
| CFU/ml sau CFU/g | MPN/100 ml |
| Calcul | |
| CFU se calculează prin numărarea numărului de colonii crescute pe plăci de agar. | MPN este calculat prin compararea modelelor pozitive și negative ale tuburilor cu tabelul statistic MPN. |
| Tehnica de diluare în serie | |
| Se efectuează diluția în serie înainte de a plasa probele pe plăci de agar. | Diluția în serie nu este efectuată în mod normal când se calculează MPN |
| Metode | |
| Metoda plăcii de împrăștiere și metoda plăcii de turnare sunt două tipuri de metode efectuate pentru a obține CFU. | Fermentația cu mai multe tuburi este metoda efectuată pentru a obține valoarea MPN. |
Rezumat – CFU vs MPN
Măsurarea creșterii microbiene este necesară din mai multe motive. În fabricile de procesare a alimentelor, este necesar să se măsoare nivelul și tipul de microorganisme din alimente. În industria alimentară și în medicină, este necesar să se asigure că tratamentele de sterilizare sunt aplicate eficient. În stațiile de tratare a apelor uzate, este necesar să se ia în mod obișnuit numărarea microbilor. La optimizarea procedurii în biologia moleculară, este necesar să se măsoare numărul de colonii de pe plăci. Prin urmare, există diferite metode de enumerare și măsurare a creșterii disponibile. CFU și MPN sunt două astfel de metode adoptate pe scară largă în diverse domenii. CFU este o măsură a numărului de colonii bacteriene și fungice viabile prezente într-o probă dată. Se calculează folosind metoda standard de numărare a plăcilor sau metoda viabilă de numărare a plăcilor. MPN este o altă măsură care exprimă numărul de celule bacteriene prezente într-un anumit volum al probei lichide. Se calculează utilizând metoda de fermentație în tuburi multiple și tabelul MPN. Aceasta este diferența dintre CFU și MPN.
Descărcați versiunea PDF a CFU vs MPN
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline, conform notelor de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre CFU și MPN.
