Diferența cheie – Hibridarea in situ vs imunohistochimie
Diagnosticarea cancerului și a bolilor infecțioase este o tendință populară în care noi tehnici bazate pe proteomică și genomică sunt utilizate în scopul identificării tumorilor sau celulelor infecțioase, a proliferării acestora și a locurilor de dezvoltare a celulelor și pentru a analiza bazele genetice ale celor mai transmisibile și transmisibile. bolile netransmisibile. Acest lucru va duce la procesarea și proiectarea corectă a medicamentelor și la dezvoltarea de terapii personalizate pentru boli. Hibridizarea in situ (ISH) și imunohistochimia (IHC) sunt două astfel de tehnici utilizate pe scară largă în biologia cancerului, iar diferența cheie între hibridizarea in situ și imunochimia constă în moleculele care sunt utilizate în procedura de analiză. În ISH, sondele de acid nucleic sunt utilizate în analiză, în timp ce, în IHC, anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru determinările diagnostice.
Ce este hibridizarea in situ (ISH)?
Hbridizarea in situ este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care se realizează direct pe o porțiune sau secțiune de țesut, în întregul țesut sau în celule. Tehnica depinde de teoria împerecherii bazelor complementare Watson Crick, rezultând fie hibrizi ADN-ADN, fie hibrizi ADN-ARN care pot detecta gene mutante sau pot identifica gena necesară de interes. Secvențele de ADN monocatenar, secvențele de ADN dublu catenar, secvențele de ARN monocatenar sau secvențele de oligonucleotide sintetice sunt utilizate ca sonde în timpul tehnicii de hibridizare, iar aceste sonde sunt marcate cu un fosfor radioactiv la capătul său 5’ pentru procedurile de identificare prin autoradiografie sau marcate cu coloranți fluorescenți.. Există diferite tipuri de tehnici ISH disponibile în funcție de tipul de sondă utilizată și de tipul de tehnică de vizualizare urmată.
Figura 01: Hibridare fluorescentă in situ
Există multe aplicații ale ISH, în principal în diagnosticarea moleculară a bolilor infecțioase pentru a identifica prezența agenților patogeni și a confirma agentul patogen prin diagnosticare moleculară. Este, de asemenea, utilizat în domeniile biologiei dezvoltării, cariotipării și analizei filogenetice și cartografierii fizice a cromozomilor.
Ce este imunohistochimia (IHC)?
În tehnica IHC, principala moleculă analizată este antigenul. În timpul IHC, anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenelor la infecție sau starea de proliferare a celulelor maligne. Tehnica se bazează pe legarea antigen-anticorp, iar pentru această tehnică se folosesc etichete de enzime; o astfel de aplicație este ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). Markerii pot fi, de asemenea, anticorpi marcați fluorescenți sau anticorpi marcați radio.
Figura 02: Imunohistochimie
IHC este utilizat pe scară largă pentru detectarea celulelor canceroase. Procedurile de diagnostic vizează antigenele prezente pe celulele tumorale pentru a identifica și caracteriza tumora. Aceeași procedură este încorporată pentru diagnosticarea agenților infecțioși. Anticorpii monoclonali și policlonali sunt, de asemenea, utilizați pentru a analiza diferite produse genetice, permițând reacția de legare anticorp-antigen între proteina dorită și anticorpul sintetic administrat.
Care sunt asemănările dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?
- ISH și IHC sunt reacții foarte specifice.
- Ambele tehnici sunt foarte precise.
- Ambele tehnici pot fi utilizate în diagnosticarea cancerului și a bolilor infecțioase.
- Aceste tehnici sunt efectuate în medii sterile in vitro.
- Ambele sunt tehnici rapide care oferă rezultate reproductibile.
- ISH și IHC folosesc metode de detectare, cum ar fi etichetarea radio și tehnici de fluorescență.
Care este diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?
Hibridare in situ vs imunohistochimie |
|
| ISH este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care se realizează direct pe o porțiune sau secțiune de țesut sau pe întregul țesut. | IHC este o tehnică în care anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenelor, care sunt markeri proteici speciali plasați pe suprafața celulelor. |
| Tip de biomolecule analizate | |
| ISH analizează acizii nucleici. | IHC analizează proteine-antigene. |
| Baza reacției biochimice | |
| În această tehnică apare o împerechere de baze complementară între ADN-ADN sau ADN-ARN. | Interacțiunile antigen-anticorp sunt implicate în imunohistochimie. |
| Metode de detectare legate de enzime | |
| Metodele de detectare legate de enzime nu pot fi utilizate în ISH. | Metodele de detectare legate de enzime pot fi utilizate în IHC. |
Rezumat – Hibridarea in situ vs imunohistochimie
Diagnosticele moleculare sunt metode rapide și de confirmare care pot fi utilizate pentru a identifica o boală netransmisibilă, cum ar fi cancerul sau boli transmisibile, cum ar fi HIV sau tuberculoza, pe baza markerilor moleculari prezenți pe celule care duc la manifestarea bolii.. Markerii moleculari pot fi prezenți sub formă de proteine exprimate sau la nivel genetic pe baza cărora sunt introduse diferite tehnici noi pentru a crește eficiența și sunt mai puțin laborioase, deși există un cost ridicat implicat cu aceste tehnici. Astfel, ISH depinde de formarea hibridului ADN-ADN sau ADN-ARN, iar IHC depinde de reacțiile specifice dintre anticorp și antigen. Aceasta este diferența dintre hibridizarea in situ.
Descărcați versiunea PDF a hibridizării in situ vs imunohistochimie
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline, conform nota de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia.
