Diferența cheie – Imunocitochimie vs Imunohistochimie
Imunocitochimia (ICC) și imunohistochimia (IHC) sunt două tehnici utilizate pe scară largă în diagnosticarea moleculară, care identifică și confirmă apariția atât a bolilor netransmisibile, cât și a bolilor transmisibile pe baza markerilor moleculari prezenți pe celule. Diferența cheie între imunocitochimia și imunohistochimia este molecula care este utilizată ca procedură de analiză în aceste tehnici. În ICC, anticorpii primari și secundari conjugați cu markeri cum ar fi fluorescența sunt utilizați, în timp ce anticorpii IHC, monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru determinările diagnostice.
Ce este imunocitochimia (ICC)?
ICC utilizează anticorpi primari și secundari legați de markeri precum markeri fluorescenți sau enzime și este o metodă de detectare puternică pentru a detecta antigenele prezenți pe celulele țintă care pot fi fie particule celulare infecțioase, fie celule tumorale canceroase. Sunt necesare trei tipuri de controale pentru imunocitochimie.
- Anticorp primar – control care arată specificitatea legării anticorpului primar la antigen
- Anticorp secundar – control care arată că eticheta este specifică anticorpului primar
- Controale pentru etichete – arată că etichetarea este rezultatul etichetei adăugate și nu rezultatul etichetării endogene.
Figura 01: Imunocitochimia etichetează proteinele individuale din celule (aici, tirozin-hidroxilaza din axonii neuronilor autonomi simpatici sunt afișate cu verde).
Controlul primar al anticorpilor este specific pentru fiecare anticorp nou și nu poate fi repetat pentru fiecare experiment. Controlul anticorpului secundar este proiectat pe baza anticorpului primar utilizat în experiment și este inclus cu fiecare experiment. Controlul de etichetare este inclus dacă o condiție a procedurii este modificată, proba este schimbată sau când este găsită o etichetare neașteptată.
Cele două aplicații principale ale ICC sunt Radio Immuno – Assay (RIA) și Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Cel mai frecvent anticorp folosit este imunoglobulina G.
Ce este imunohistochimia (IHC)?
În imunohistochimie, proba sursă conține anticorpi monoclonali și policlonali pentru a determina prezența antigenelor în celulele străine. Această tehnică se bazează pe reacția specifică de legare antigen-anticorp. Anticorpii utilizați în detecție pot fi marcați cu diferiți markeri; pot fi markeri de fluorescență, markeri radiomarcați sau markeri chimici. Prin facilitarea legării in vitro între antigen și anticorpul vizat, se poate determina prezența sau absența unei anumite proteine a unei celule.
Figura 02: Colorarea imunohistochimică a rinichiului normal cu CD10
În prezent, oamenii de știință sunt implicați în dezvoltarea anticorpilor țintă pentru antigeni specifici prezenți în celule care se pot dezvolta fie ca celule tumorale maligne, fie ca antigeni prezenți în agenți infecțioși precum HIV.
Care sunt asemănările dintre imunocitochimie și imunohistochimie?
- Reacțiile sunt foarte specifice și precise în ICC și IHC.
- Aplicațiile ICC și IHC includ diagnosticarea cancerului și a bolilor infecțioase.
- Condițiile sterile trebuie menținute în ambele condiții și ar trebui efectuate in vitro
- Ambele tehnici oferă rezultate reproductibile.
- Ambele sunt rapide.
- Etichetarea radio, tehnicile de fluorescență sunt utilizate ca metode de detectare atât în ICC, cât și în IHC.
- Ambele se bazează pe împerecherea antigen-anticorp.
Care este diferența dintre imunocitochimie și imunohistochimie?
Imunocitochimie (ICC) vs imunohistochimie (IHC) |
|
| ICC folosește markeri legați de anticorpi primari și secundari, cum ar fi markeri fluorescenți sau enzime și este o metodă puternică de detectare pentru a detecta antigenele prezenți pe celulele țintă. | IHC este o metodă care utilizează anticorpi monoclonali și policlonali pentru a determina prezența antigenelor care sunt markeri proteici speciali plasați pe suprafața celulelor. |
| Sursa eșantion | |
| Probele derivate din țesuturi care au fost prelucrate histologic în secțiuni subțiri sunt utilizate în ICC. | IHC folosește mostre formate din celule crescute într-un monostrat sau celule în suspensie care sunt depuse pe o lamă. |
| Procesare eșantion | |
| În ICC, celulele ar trebui să fie permeabile pentru a facilita pătrunderea anticorpilor către țintele intracelulare. | În IHC, celulele sunt fixate în formalină, încorporate în parafină înainte de colorare. |
Rezumat – Imunocitochimie vs imunohistochimie
Diagnosticarea moleculară este utilizată pentru a identifica și confirma apariția atât a bolilor netransmisibile, cât și a bolilor transmisibile, pe baza markerilor moleculari prezenți pe celule. Markerii moleculari pot fi proteine sau secvențe de ADN sau ARN; dezvoltarea de tehnologii precum ICC și IHC a deschis calea pentru ca oamenii de știință să identifice boala și cauza acesteia într-un stadiu incipient. Atât ICC, cât și IHC depind de reacțiile specifice dintre anticorp și antigen, deși sursa probei. Principala diferență dintre imunocitochimie și imunohistochimie este procesarea probelor din cele două proceduri.
Descărcați versiunea PDF de Imunocitochimie vs Imunohistochimie
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți utiliza în scopuri offline, conform nota de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre imunocitochimie și imunohistochimie.
