Diferența cheie dintre numărul total de celule și numărul de celule viabile este că numărul total de celule estimează toate celulele, inclusiv celulele microbiene vii și cele moarte dintr-o probă, în timp ce numărul de celule viabile estimează doar celulele microbiene vii dintr-o probă.
Numărarea numărului de organisme dintr-o populație este considerată necesară pentru majoritatea lucrărilor experimentale. Prin urmare, încercăm să analizăm numărul de microbi dintr-o probă folosind metode directe și indirecte. Măsurătorile directe implică metode care numără direct numerele de celule. Măsurătorile indirecte implică măsurarea unui parametru care poate fi legat de numărul de celule, cum ar fi densitatea celulelor, greutatea uscată etc. Unele metode cuantifică doar celulele microbiene vii dintr-o probă. Numărarea celulelor viabile este o astfel de metodă. Numărările microscopice directe cuantifică toate celulele dintr-un volum cunoscut de mediu/probă folosind un microscop. Prin urmare, numără atât celulele vii, cât și cele moarte. Este un tip de număr total de celule.
Ce este numărul total de celule?
Numărarea totală a celulelor este metoda care implică numărarea tuturor celulelor dintr-un volum cunoscut de mediu/probă folosind un microscop și o cameră de numărare (hemocitometru). Spre deosebire de numărările viabile, sunt numărate atât celulele vii, cât și cele moarte. Prin urmare, acesta este un număr total, cu excepția cazului în care se aplică o pată de viabilitate în timpul observației. În microscopie, celulele sunt observate direct la microscop și numărate. Utilizează o suspensie celulară care constă din celule microbiene. Pentru ușurința numărării și măsurători precise, se poate face diluarea probei. În concentrații foarte mari/scăzute de celule, obținerea numărului total de celule folosind un microscop este o sarcină dificilă.
Figura 01: Camera de numărare – Hemocitometru
Camere de numărare sunt ușoare, ieftine și rapide în a lua un număr total de celule. Cel mai important, camerele de numărare sunt utile atât pentru numărarea eucariotelor, cât și a procariotelor. Numărăm celulele în pătratele selectate de volum cunoscut pentru a cuantifica numărul total de celule.
Ce este numărul de celule viabile?
Numărarea celulelor viabile este o metodă de numărare a celulelor microbiene vii dintr-o probă. Numărează doar celulele vii din probă. Numărarea plăcilor viabile, filtrarea prin membrană și numărul cel mai probabil sunt câteva tehnici viabile de numărare a celulelor. Aceste abordări sunt bazate pe creștere. Metoda de numărare a plăcilor viabile este o metodă puternică utilizată în multe domenii microbiologice, inclusiv microbiologia alimentară și a produselor lactate, microbiologia medicală, microbiologia mediului, genetica microbiană, dezvoltarea mediului de creștere și biotehnologie.
Cea mai obișnuită modalitate de a număra bacteriile viabile este utilizarea unei probe capabile să formeze colonii pe un mediu de agar. Există două modalități principale de a efectua o numărare a plăcilor: tehnica plăcii de împrăștiere și tehnica plăcii de turnare. Un volum cunoscut de probă poate fi fie răspândit pe suprafața unei plăci de agar, fie amestecat în agar. Placa este apoi incubată și coloniile care apar sunt numărate. Numărul de colonii este legat de numărul de microorganisme din proba originală. Numărările viabile măsoară doar acele celule care sunt vii și în creștere.
Figura 02: Număr de plăci viabile
Numărul cel mai probabil (MPN) este o alternativă la metodele de numărare a plăcilor pentru estimarea densității populației de celule viabile. Ea numără organismele care cresc în cultură lichidă și, prin urmare, este o tehnică predominant bacteriologică. Este deosebit de util pentru concentrații scăzute de organisme, de ex. lapte, apă potabilă.
Tehnica de filtrare cu membrană este mai potrivită atunci când microbii sunt foarte diluați, ca în sursa de apă a unui oraș. Se face pur și simplu prin trecerea unui volum cunoscut de lichid printr-un filtru și incubarea acestuia pe un mediu nutritiv. Coloniile care se dezvoltă pe filtru sunt numărate și bacteriile pe mililitru de probă sunt calculate.
Care sunt asemănările dintre numărul total de celule și numărul de celule viabile?
- Numărul total de celule și numărul de celule viabile sunt două tipuri de tehnici microbiene care cuantifică celulele.
- Sunt tehnici de enumerare utilizate în mod obișnuit în laboratoarele de microbiologie.
Care este diferența dintre numărul total de celule și numărul de celule viabile?
Numărul total de celule enumerează toate celulele microbiene vii și moarte dintr-o probă. În schimb, numărul de celule viabile enumerează numai celulele vii dintr-o probă. Deci, aceasta este diferența cheie între numărul total de celule și numărul de celule viabile. Numărul total de celule este independent de creșterea coloniilor pe plăcile de agar, în timp ce numărul de celule viabile este o tehnică bazată pe creștere și depinde de creșterea coloniilor microbiene pe plăcile de agar.
Graficul informativ de mai jos rezumă diferența dintre numărul total de celule și numărul de celule viabile.
Rezumat – Numărul total de celule vs Numărul de celule viabile
Numărul total de celule enumerează atât celulele microbiene vii, cât și cele moarte, în timp ce numărul de celule viabile enumeră numai celulele vii. Astfel, aceasta este diferența cheie între numărul total de celule și numărul de celule viabile. De asemenea, numărul de celule viabile este o tehnică bazată pe creștere, spre deosebire de numărul total de celule. Mai mult, necesită incubarea plăcilor până la obținerea coloniilor vizibile. Numărarea pe plăci viabile, MPN și filtrarea pe membrană sunt câteva tehnici de numărare a celulelor viabile, în timp ce microscopia directă și utilizarea hemocitometrului sunt două tehnici de numărare totală a celulelor.
