Diferența cheie – HPLC vs LCMS
Să ne uităm mai întâi la semnificația HPLC și LCMS înainte de a analiza diferența dintre HPLC și LCMS. Cromatografia este o tehnică de separare în analiza chimică în care constituenții probei sunt separați în timpul trecerii printr-un mediu cromatografic. De asemenea, implică interacțiunea cu proba, faza staționară și faza mobilă. HPLC înseamnă cromatografie lichidă de în altă performanță și este utilizată ca metodă de cromatografie lichidă în chimia analitică. Combinația de cromatografie lichidă și spectroscopie de masă (LCMS) a fost dezvoltată pentru analiza cantitativă a biomoleculelor selectate și este o procedură de testare foarte sensibilă, precisă și specifică în comparație cu HPLC. Aceasta este diferența cheie dintre HPLC și LCMC. Acest articol vă va prezenta HPLC și LCMC care se ocupă de analiza chimică și va discuta despre diferențele dintre HPLC și LCMS.
Ce este HPLC?
Cromatografia lichidă de în altă performanță (HPLC) este o tehnică populară de separare în chimia analitică. Este folosit în principal pentru a separa componentele, pentru a identifica și pentru a cuantifica fiecare component dintr-un amestec. Anterior, această metodă era cunoscută sub numele de cromatografie lichidă de în altă presiune, deoarece depindea de pompe pentru a curge un solvent lichid sub presiune care cuprinde amestecul de probă printr-o coloană plină cu un material adsorbant solid. Fiecare constituent din amestecul de probă interacționează diferit cu materialul adsorbant solid, ceea ce are ca rezultat debite diferite pentru diferiți constituenți. Acest lucru poate duce la separarea constituenților pe măsură ce curg din coloana HPLC.
HPLC a fost utilizat pentru diverse aplicații, cum ar fi analiza nivelurilor de vitamina D din sânge, consumul ilegal de droguri de către sportivi prin detectarea reziduurilor de droguri în urină, sortarea constituenților unei probe biologice complexe în scopuri de cercetare și analiză. și fabricarea de produse farmaceutice.
Ce este LCMS?
Cromatografie lichidă-spectrometrie de masă (LCMS) este o tehnică analitică care combină abilitățile de separare fizică ale cromatografiei lichide cu abilitățile de analiză de masă ale spectrometriei de masă (MS). Cromatografia lichidă este o tehnică de separare, iar spectrometria de masă este utilizată pentru a analiza raportul masă-încărcare al particulelor încărcate. Separarea fizică este de obicei realizată prin HPLC și, alternativ, LCMS cunoscută și ca HPLC-MS. LCMS este o tehnică analitică dominantă care are o acuratețe, sensibilitate și specificitate foarte ridicate în comparație cu HPLC. Astfel, este util în multe aplicații, cum ar fi scopuri de cercetare, analiza medicamentelor, analiza alimentelor etc. LCMS este utilizat în principal pentru a separa, detecta, identifica și cuantifica proprietățile biochimice ale unei anumite probe în prezența amestecurilor chimice complexe.
Care este diferența dintre HPLC și LCMC?
Acronim și definiția HPLC și LCMC
HPLC: HPLC înseamnă cromatografie lichidă de în altă performanță. Este o tehnică de separare care este folosită în principal pentru a separa componentele, pentru a identifica și pentru a cuantifica fiecare component dintr-un amestec.
LCMS: LCMS înseamnă Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Este o tehnică analitică care combină abilitățile de separare fizică ale cromatografiei lichide cu abilitățile de analiză de masă ale spectrometriei de masă (MS).
Caracteristicile HPLC și LCMC
Clasificare
HPLC: aceasta este doar o metodă de cromatografie lichidă.
LCMS: aceasta este o combinație între metoda cromatografiei lichide și metoda spectrometriei de masă.
Eficiență
HPLC: în comparație cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin eficientă și mai lentă.
LCMS: în comparație cu HPLC, analiza LCMS este eficientă și mai rapidă.
Sensibilitate
HPLC: în comparație cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin sensibilă.
LCMS: în comparație cu HPLC, analiza LCMS este mai sensibilă.
specificitate
HPLC: în comparație cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin specifică.
LCMS: în comparație cu HPLC, analiza LCMS este mai specifică.
Acuratețe
HPLC: HPLC oferă rezultate mai puțin precise decât LCMS pentru determinarea unor substanțe chimice.
LCMS: LCMS oferă rezultate mai precise decât HPLC pentru determinarea unor substanțe chimice.
component
HPLC: HPLC poate fi considerată o componentă a LCMS.
LCMS: LCMS nu poate fi considerat o componentă a HPLC.
Sursa de ioni
HPLC: sursa de ioni nu există în instrumentul HPLC.
LCMS: sursa de ioni este prezentă în instrumentul LCMS.
Aplicații
HPLC: ionii, polimerii, moleculele organice și biomoleculele pot fi analizate folosind HPLC.
LCMS: Moleculele organice și biomoleculele pot fi analizate. Spre deosebire de HPLC, LCMS poate fi folosit pentru a examina amestecuri incomplet rezolvate.
Operațiune
HPLC: Diagrama unui instrument HPLC este prezentată în figura 1 și, de obicei, include un autosampler, pompe și un detector. Prelevatorul introduce amestecul de probă în faza mobilă (amestec presurizat de solvenți precum apa, acetonitril și/sau metanol) care îl transferă în coloană. Pompele furnizează debitul dorit și compoziția fazei mobile prin coloană. Coloana este umplută cu adsorbant, care este o particule solidă granulată, cum ar fi silice sau polimeri. Detectorul produce un semnal proporțional cu cantitatea de prezență a constituentului eșantionului în coloană, permițând astfel o analiză cuantificabilă a constituenților eșantionului selectați. Instrumentul HPLC este controlat, iar analiza datelor este furnizată de un microprocesor digital și software de utilizator.
Figura 1: Diagrama instrumentului HPLC
LCMS: Diagrama instrumentului LCMS este prezentată în figura 2. Extractul de probă este introdus în coloana constând din HPLC. Această coloană reține metaboliții eșantionului pe baza caracterelor fizice și diferiți metaboliți curg către spectrometrul de masă la intervale de timp diferite. Spectroscopia de masă este utilizată pentru evaluarea maselor de particule, pentru determinarea aranjamentului elementar al unei molecule și pentru clarificarea structurilor moleculei. Cu toate acestea, proba ar trebui să fie ionizată pentru a genera molecule încărcate pentru a determina raportul lor masă-încărcare. Prin urmare, în loc de instrumente HPLC, LCMS constă în trei module suplimentare, cum ar fi sursa de fier, un analizor de masă și un detector. O sursă de ioni poate transforma proba de fază gazoasă în ioni și un analizor de masă grupând ionii după masele lor folosind câmpuri electromagnetice. În cele din urmă, un detector cuantifică valorile și furnizează datele fiecărui ion prezent în probă. Tehnica LCMS poate fi utilizată atât pentru aplicații calitative, cât și cantitative.
Figura 2: Diagrama instrumentului LCMS
În concluzie, HPLC este o metodă de cromatografie lichidă, în timp ce LCMS este o combinație de cromatografie lichidă și spectrometrie de masă. Ambele tehnici de analiză au caracteristici diferite, dar pot fi utilizate pentru a identifica și cuantifica compozițiile alimentare, produsele farmaceutice și alte molecule bioactive.