Diferența cheie dintre HPLC și UPLC este că HPLC permite analiza particulelor cu dimensiunea lor de aproximativ 5 micrometri, în timp ce UPLC permite particule mult mai mici în jur de 2 micrometri.
HPLC și UPLC sunt ambele tehnici de cromatografie lichidă care sunt utile în separarea componentelor unui compus. Pentru a ști diferența dintre HPLC și UPLC, mai întâi trebuie să știm ce este HPLC. Acest lucru se datorează faptului că UPLC este o versiune specială a HPLC și o putem înțelege cu ușurință dacă știm ce este HPLC.
Ce este HPLC?
Termenul HPLC înseamnă cromatografie lichidă de în altă performanță. Este o tehnică pe care o putem folosi pentru a separa diferiți constituenți ai unui compus. De asemenea, este cea mai utilizată tehnică pentru identificarea, cuantificarea și separarea componentelor unui amestec. În plus, această tehnică folosește o presiune mare pentru a împinge solvenții prin coloană. În plus, aplicațiile majore ale HPLC sunt în biochimie pentru analiza constituenților unui compus. Este o modalitate ideală de separare și identificare a aminoacizilor, acizilor nucleici, proteinelor, hidrocarburilor, pesticidelor, carbohidraților, antibioticelor, steroizilor și a nenumăratelor alte substanțe anorganice.
Figura 01: Sistemul HPLC într-un laborator
Pe scurt, metoda de operare a tehnicii HPLC este următoarea. În primul rând, ar trebui să introducem proba în fluxul fazei mobile în cantități mici discrete folosind o pompă. Presiunea pompei trebuie menținută la 40 MPa. Apoi, acest flux de fază mobilă perculează prin coloana de HPLC. De asemenea, componentele din probă trec prin coloană. Cu toate acestea, vitezele lor de mișcare sunt diferite una de ceal altă. Această diferență apare din cauza diferenței de interacțiuni dintre componentele probei și adsorbantul din interiorul coloanei. Numim acest adsorbant fază staționară deoarece se află în interiorul coloanei (nu se mișcă). În al doilea rând, la capătul coloanei, putem colecta proba care eluează din coloană. Acolo putem determina diferențele de timpi de retenție pentru fiecare componentă din eșantion.
Ce este UPLC?
Termenul UPLC înseamnă cromatografie lichidă de ultra-în altă performanță. Este o variație a HPLC, dar metoda de funcționare este aceeași. Cu toate acestea, spre deosebire de HPLC, această metodă permite analizarea particulelor foarte mici, cum ar fi particulele mici de 2 micrometri.
Figura 02: Un dispozitiv UPLC
În plus, oferă o analiză mai rapidă. În această tehnică, folosim o presiune de pompă de 100 MPa pentru introducerea probei în coloană. Prin urmare, această presiune ridicată confirmă că întreaga probă este introdusă în coloană. Astfel, acest lucru este foarte eficient în comparație cu HPLC.
Care este diferența dintre HPLC și UPLC?
Termenul HPLC înseamnă cromatografie lichidă de în altă performanță, în timp ce termenul UPLC înseamnă cromatografie lichidă de în altă performanță. Prin urmare, tehnica UPLC este o versiune dezvoltată a HPLC. Astfel, metoda de operare este aceeași pentru ambele tehnici. Cu toate acestea, UPLC este mai eficient în comparație cu HPLC, deoarece folosește o presiune mare a pompei; presiunea pompei pentru HPLC este de 40 MPA în timp ce este de 100 MPa pentru UPLC. Prin urmare, aceasta este o diferență între HPLC și UPLC. Mai presus de toate, diferența cheie dintre HPLC și UPLC este că HPLC permite analiza particulelor cu dimensiunea lor de aproximativ 5 micrometri, în timp ce UPLC permite particule mult mai mici în jur de 2 micrometri.
Rezumat – HPLC vs UPLC
UPLC este o formă de HPLC. Astfel, metodele de operare sunt aceleași. Dar, putem găsi câteva caracteristici îmbunătățite în UPLC în comparație cu HPLC. Prin urmare, există o diferență între HPLC și UPLC. Cu toate acestea, diferența cheie dintre HPLC și UPLC este că HPLC permite analiza particulelor cu dimensiunea lor de aproximativ 5 micrometri, în timp ce UPLC permite particule mult mai mici în jur de 2 micrometri.
