Diferența cheie dintre vectorul de clonare și vectorul de expresie este că vectorul de clonare transportă un fragment de ADN străin în celula gazdă, în timp ce vectorul de expresie facilitează exprimarea genelor în proteine.
Vector este un termen important în biologia moleculară. În tehnologia ADN-ului recombinant, rolul principal al unui vector este de a oferi un mod de transport către o fracțiune de ADN utilă pentru a fi introdusă într-o celulă gazdă. Mai mult, este o moleculă de ADN folosită pentru a transporta un fragment de ADN străin în mod artificial într-o celulă gazdă pentru a fi exprimat sau replicat. Cei mai folosiți vectori sunt plasmidele, vectorii virali, cosmidele și cromozomii artificiali. Vectorul de clonare și vectorul de expresie sunt două tipuri de vectori clasificați în funcție de aplicațiile lor.
Ce este un vector de clonare?
Un vector de clonare este o fracțiune de ADN care poate fi utilizată pentru a introduce o moleculă de ADN străină și are capacitatea de a fi inserată într-o gazdă în scopul clonării. O caracteristică ideală a unui vector de donare este inserarea/înlăturarea ușoară a fragmentului de ADN prin tratamentul cu enzimă de restricție și tratamentul cu enzimă de ligatură. În acest aspect, vectorii de clonare folosiți frecvent sunt plasmidele modificate genetic.
Figura 01: Vector de clonare
Un vector de clonare ar trebui să aibă un site de clonare multiplu, o genă marker selectabilă și o genă reporter. Scopul unui site de clonare este de a oferi un loc pentru a avea loc clonarea. O genă marker selectabilă ajută la identificarea recombinanților de succes după donare, iar o genă reporter permite screening-ul și identificarea recombinantului corect printre recombinanți după donare. Vectorul de donare nu ajută neapărat la exprimarea unei proteine pe care o codifică ADN-ul străin. Astfel, singurul scop al vectorului de clonare este de a transporta ADN străin către gazdă.
Ce este un vector de expresie?
Vectorul de expresie, numit și construct de expresie, este un tip de vector utilizat pentru exprimarea proteinelor în interiorul celulei gazdă. Ca orice vector, acesta ar trebui să conțină, de asemenea, părțile principale un site de clonare multiplă, o genă marker și o genă reporter. Vectorul introduce o nouă genă în gazdă și, folosind mecanismul de sinteză a proteinelor gazdei, permite ca gena să fie exprimată în gazdă. Mai mult, obiectivul său inițial este de a produce m-ARN stabil și, prin urmare, de a produce proteine. Un bun exemplu este producția comercială de insulină. Gena insulinei este introdusă într-o plasmidă bacteriană și inserată înapoi în E.coli, permițând plasmidelor să se înmulțească și permițând E. coli să crească, secretând insulină care poate fi colectată și utilizată.
Figura 02: Vector de expresie
În plus, un vector de expresie ar trebui să aibă o regiune promotor puternică, o secvență corectă de inițiere a translației și un codon terminator corect și o secvență. Vectorii de expresie au numeroase aplicații în producerea de peptide și proteine pentru industria farmaceutică, cum ar fi producerea de insulină, hormon de creștere, antibiotice, vaccinuri, anticorpi. Mai mult, vectorii de expresie ajută la producția de enzime în industria alimentară și a confecțiilor. Nu numai că, vectorii de expresie sunt esențiali în producerea de plante transgenice precum orezul auriu, plantele rezistente la insecte, plantele rezistente la erbicide etc.
Care sunt asemănările dintre vectorul de clonare și vectorul de expresie?
- Vectorul de clonare și vectorul de expresie sunt două tipuri de vectori pe care îi folosim în tehnologia ADN-ului recombinant și în ingineria genetică.
- Ambele conțin o genă marker și o genă reporter.
- În plus, ele constau din mai multe site-uri de clonare.
- De asemenea, au o origine a replicării și capacitatea de a se auto-replica.
Care este diferența dintre vectorul de clonare și vectorul de expresie?
Un vector de clonare este o moleculă mică de ADN care poartă un fragment de ADN străin în celula gazdă, în timp ce vectorul de expresie este un tip de vector care facilitează introducerea, exprimarea genelor și producerea de proteine. Deci, aceasta este diferența cheie dintre vectorul de clonare și vectorul de expresie. Mai mult, o altă diferență semnificativă între vectorul de donare și vectorul de expresie este că un vector de donare introduce un fragment de ADN străin într-o gazdă, în timp ce vectorii de expresie exprimă gena introdusă prin producerea proteinei relevante.
În plus, vectorul de clonare constă dintr-o origine a replicării, site-uri de restricție și un marker selectabil. În timp ce, vectorul de expresie conține amplificatori, regiunea promotor, codon de terminare, secvență de inițiere a transcripției, o origine a replicării, situsuri de restricție și un marker selectabil. Prin urmare, aceasta este, de asemenea, o diferență între vectorul de clonare și vectorul de expresie. În plus, plasmidele, bacteriofagii, cromozomii artificiali bacterieni, cosmidele, cromozomii artificiali de mamifere, cromozomii artificiali de drojdie etc. sunt exemple de vectori de clonare. Între timp, vectorii de expresie sunt în mare parte plasmide.
Rezumat – Vector de clonare vs Vector de expresie
Pe baza funcției lor în biologia moleculară, există două tipuri de vectori ca vector de clonare și vector de expresie. Un vector de clonare este o moleculă mică de ADN care furnizează ADN străin în celula gazdă. Există diferite tipuri de vectori de clonare, cum ar fi plasmide, bacteriofagi, cromozomi artificiali bacterieni, cosmide și cromozomi artificiali de mamifere. În contrast, un vector de expresie este o plasmidă care introduce gena de interes în celula gazdă și facilitează expresia genei pentru a obține produsul proteic. Vectorii de expresie sunt plasmide. Astfel, acesta este rezumatul diferenței dintre vectorul de clonare și vectorul de expresie.
