Diferența cheie dintre ELISA competitiv și necompetitiv este că ELISA competitiv folosește un antigen de inhibiție, în timp ce ELISA necompetitiv nu folosește un antigen de inhibiție pentru test.
Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) este un test imunologic care detectează diverse ținte, cum ar fi anticorpi, antigeni, proteine și glicoproteine. Este o metodă rapidă și simplă de efectuat. Prin urmare, este mai des folosit în scopuri de cercetare și diagnostic. ELISA implică utilizarea enzimelor și legarea specifică a anticorpilor și antigenului. Pe baza modului în care apar reacțiile, există patru tipuri de ELISA: ELISA directă, ELISA indirectă, ELISA sandwich și ELISA de inhibiție. ELISA directă, indirectă și tip sandwich sunt tipuri de ELISA necompetitive, în timp ce ELISA de inhibiție este un tip de ELISA completă. Scopul principal al acestui articol este de a discuta diferența dintre ELISA competitiv și necompetitiv.
Ce este ELISA competitiv?
ELISA competitiv măsoară concentrația de antigen dintr-o probă prin detectarea interferenței semnalului. Aici, testul folosește un antigen inhibitor. Prin urmare, este un tip de ELISA de inhibiție. În timpul acestei proceduri, antigenele prezenți în probă concurează cu antigenul de referință selectat pentru legarea la o cantitate specifică de anticorp marcat. Mai mult, această procedură începe cu incubarea probei, cu cantitatea în exces de anticorp marcat. De asemenea, antigenul de referință ar trebui să fie pre-acoperit pe o placă de analiză cu godeuri multiple. Apoi amestecul de probă trebuie adăugat pe placa de analiză care conține antigenul de referință. Anticorpii liberi se vor lega de antigenul de referință în funcție de cantitatea de antigen din probă. Prin urmare, dacă este prezent mai mult antigen de probă, va fi detectat mai puțin antigen de referință. Astfel, creează un semnal mai slab.
Figura 01: ELISA
În schimb, atunci când proba conține o cantitate mai mică de antigen, tot mai mult antigen de referință va ocupa anticorpii și va da un semnal puternic. Deoarece ELISA competitivă dă un semnal mai puternic atunci când proba conține o cantitate mică de antigene, ELISA competitivă este un test foarte sensibil, chiar și pentru probele cu un număr mic de antigeni.
În unele truse ELISA competitive, se folosește un antigen marcat în locul unui anticorp marcat. Aici, antigenul marcat și antigenul probă vor concura pentru legarea la anticorpul primar. În mod similar, atunci când cantitatea de antigen din probă este scăzută, cantitatea de antigen marcat care se leagă de anticorpi va fi mai mare și va crea un semnal mai puternic.
Ce este ELISA necompetitiv?
Dintre cele patru tipuri de ELISA, trei tipuri sunt ELISA necompetitive. Acestea sunt ELISA direct, ELISA indirect și ELISA sandwich. Toate cele trei formate funcționează conform principiului comun al ELISA, cu ușoare diferențe în metodologiile lor.
ELISA direct folosește un anticorp primar marcat cu enzimă. Prin urmare, nu necesită un anticorp secundar. Prin urmare, ELISA directă este mai rapidă decât alte tipuri de ELISA. Anticorpul primar se va lega direct de antigenul țintă imobilizat care este prezent în placă. Prin urmare, reacția enzimă-substrat va avea loc, producând un semnal vizibil.
Figura 02: Sandwich ELISA
Spre deosebire de ELISA direct, ELISA indirect folosește un anticorp primar nemarcat și un anticorp secundar marcat cu enzimă. Odată ce anticorpul primar se leagă de antigenul imobilizat, anticorpul secundar se leagă de anticorpul primar. Enzima din anticorpul secundar va reacționa cu antigenul și va produce un semnal vizibil. ELISA Sandwich este diferită atât de ELISA directă, cât și de cea indirectă. Aici, anticorpul este imobilizat pe peretele plăcii de testare.
Care sunt asemănările dintre ELISA competitiv și necompetitiv?
- ELISA competitiv și necompetitiv sunt două tipuri de tehnici de testare imunosorbantă.
- Sunt tehnici extrem de flexibile și sensibile.
- În plus, atât ELISA competitiv, cât și necompetitiv sunt teste imunologice legate de enzime.
- De asemenea, ambele metode generează un semnal datorită unei reacții enzimă-substrat.
Care este diferența dintre ELISA competitiv și necompetitiv?
ELISA competitivă este un tip de ELISA care se bazează pe completarea dintre antigenul analitic și antigenul marcat pentru o cantitate limitată de anticorp specific. Pe de altă parte, nu există o astfel de competiție între antigenul de interes și antigenul de referință în ELISA necompetitiv. Astfel, aceasta este diferența cheie între ELISA competitiv și necompetitiv. În mod similar, ELISA competitivă este un ELISA de inhibiție, în timp ce ELISA necompetitiv nu este un ELISA de inhibiție. Deci, aceasta este și o diferență între ELISA competitiv și necompetitiv.
În plus, ELISA competitivă este mai potrivită pentru a măsura o cantitate mică de antigen de interes. Este o metodă sensibilă. Pe de altă parte, ELISA necompetitiv nu depinde de numărul de antigene prezenți într-o probă. Prin urmare, aceasta este și o diferență între ELISA competitiv și necompetitiv.
Infograficul de mai jos explică diferența dintre ELISA competitiv și necompetitiv comparativ.
Rezumat – ELISA competitiv vs necompetitiv
ELISA competitiv și necompetitiv sunt cele două tipuri majore de ELISA sau teste imunosorbente legate de enzime. Rezumând diferența dintre ELISA competitiv și necompetitiv, ELISA competitiv se bazează pe competiția dintre antigenul de interes și antigenul de referință față de cantitatea limitată de anticorpi. Prin urmare, ELISA competitivă este denumită și ELISA de inhibiție. Pe de altă parte, ELISA necompetitiv nu se bazează pe competiția dintre antigenele țintă și antigenele de referință. Utilizează un exces de anticorp specific marcat față de analitul de interes. Astfel, aceasta este diferența cheie între ELISA competitiv și necompetitiv. ELISA direct, ELISA indirect și ELISA sandwich sunt cele trei tipuri principale de ELISA necompetitiv.
