Diferența cheie dintre BL21 și DH5 Alpha este că BL21 este o celulă E. coli competentă modificată genetic, cu deficit de protează, utilizată în principal pentru exprimarea proteinelor, în timp ce DH5 Alpha este o celulă E. coli competentă modificată genetic cu mutația recA1 utilizată în principal pentru transformarea plasmidei.
E. coli este unul dintre renumitele organisme de alegere pentru producerea de proteine recombinate. A devenit cea mai populară platformă de exprimare de-a lungul anilor. Este folosit și ca fabrică de celule. BL21 și DH5 Alpha sunt două celule de E. coli modificate genetic, utilizate în prezent pentru exprimarea proteinelor și, respectiv, transformarea plasmidei.
Ce este BL21?
BL21 este o celulă competentă E.coli modificată genetic, cu deficit de protează, utilizată în principal pentru exprimarea proteinelor. E. coli BL21 este o celulă bacteriană derivată din tulpina B. Are defecte ale proteazei Lon și proteazei membranei exterioare ompT. Este utilizat în mod obișnuit pentru exprimarea proteinelor recombinante, deoarece în mod normal aduce stabilitate proteinelor exprimate. BL21 este util pentru exprimarea proteinei cu ADN pCold I-IV și ADN pCold TF. Dar această celulă competentă de E. coli nu este destinată unui sistem de exprimare a proteinei care utilizează promotorul T7, cum ar fi sistemul pET. Motivul din spatele acestui lucru este că BL21 nu exprimă ARN polimeraza T7. În plus, nu se recomandă utilizarea pentru construcția sau prepararea plasmidei, deoarece nu are mutația recA.
Figura 01: BL21
BL21 a fost descris pentru prima dată de Studier în 1986, după diferite modificări ale liniei B. Celulele BL21 sunt deficitare în proteaza LON, care degradează multe proteine străine. Mai mult, lipsește o altă genă care codifică proteaza membranei exterioare (OmpT) a cărei funcție este de a degrada proteinele extracelulare. Lipsa acestor proteine declanșează producția de succes a proteinelor străine în celulele E. coli BL21. În plus, mutația hsdSB în aceste celule previne metilarea și perturbarea ADN-ului străin în celulele BL21.
Ce este DH5 Alpha?
DH5 Alpha este o celulă de E. coli competentă modificată genetic, cu mutație recA1, care este utilizată în principal pentru transformarea plasmidei. Celulele DH5 Alpha E. coli sunt modificate genetic de biologul american Douglas Hanahan pentru a maximiza eficiența transformării. Celula DH5 Alpha are trei mutații distincte: recA1, endA1 și lacZΔM15. recA1 este o mutație cu un singur punct care înlocuiește glicina 160 cu și un reziduu de acid aspartic în polipeptida recA. Această mutație dezactivează activitatea recombinazelor și inactivează recombinarea omoloagă. Mutația endA1 inactivează o endonuclează intracelulară care o împiedică să degradeze plasmida inserată.
Figura 02: DH5 Alpha
În plus, mutația lacZΔM15 permite screeningul alb-albastru al celulelor transformate. Aceste celule sunt celule competente. Ele sunt adesea folosite cu transformarea clorurii de calciu pentru a introduce plasmida dorită. S-a identificat prin cercetări recente că celula DH5 Alpha cu metoda Hanahan a fost cea mai eficientă celulă competentă pentru transformarea plasmidelor.
Care sunt asemănările dintre BL21 și DH5 Alpha?
- BL21 și DH5 Alpha sunt două E.coli modificate genetic
- Ambele sunt celule competente.
- Constă în mutații distincte.
- Ambele nu au habitat natural.
- Acestea sunt folosite în scopuri de laborator, cum ar fi studii de expresie și proceduri de clonare.
Care este diferența dintre BL21 și DH5 Alpha?
BL21 este o celulă competentă de E. coli modificată genetic, cu deficit de protează, utilizată în principal pentru exprimarea proteinelor. Pe de altă parte, DH5 Alpha este o celulă de E. coli competentă modificată genetic, cu mutație recA1, utilizată în principal pentru transformarea plasmidei. Deci, aceasta este diferența cheie dintre BL21 și DH5 Alpha. În plus, celula BL21 E. coli nu are mutația recA1, în timp ce celula DH5 Alpha E. coli are mutația recA1.
Următorul infografic listează diferențele dintre BL21 și DH5 Alpha sub formă tabelară.
Rezumat – BL21 vs DH5 Alpha
Tulpinile nepatogene de E. coli sunt dezvoltate genetic de oamenii de știință pentru studii de laborator de exprimare și în scopuri de clonare. BL21 și DH5 Alpha sunt două celule de E. coli modificate genetic. BL21 este utilizat în principal pentru studiile de exprimare a proteinelor. Pe de altă parte, DH5 Alpha este utilizat în principal în scopuri de transformare a plasmidelor. Astfel, acesta este rezumatul diferenței dintre BL21 și DH5 Alpha.
