Diferența cheie dintre cromatografia de schimb ionic și cromatografia de excludere a mărimii este că cromatografia de schimb de ioni este utilizată pentru a analiza substanțele ionice în funcție de sarcină, în timp ce cromatografia de excludere a mărimii este utilizată pentru a analiza molecule mari în funcție de dimensiune.
Cromatografia este o tehnică analitică care poate fi utilizată pentru a analiza diferite amestecuri. Tehnicile cromatografice sunt denumite în funcție de parametrul utilizat pentru analiza substanțelor – de ex. cromatografia de excludere a mărimii, cromatografia cu schimb de ioni etc.
Ce este cromatografia cu schimb de ioni?
Cromatografia cu schimb de ioni este o tehnică analitică în care putem analiza substanțe ionice. Este adesea util să se analizeze anionii și cationii anorganici (adică anionii de clorură și azotat și cationii de potasiu, sodiu). Deși nu este o metodă foarte comună, putem analiza ionii organici folosind ea. Mai mult, putem folosi această tehnică pentru purificarea proteinelor deoarece proteinele sunt molecule încărcate la anumite valori ale pH-ului. Aici, folosim o fază staționară solidă de care se pot atașa particulele încărcate. De exemplu, putem folosi copolimerii rășini polistiren-divinilbenzen ca suport solid.
Figura 01: Teoria din spatele cromatografiei cu schimb de ioni
Pentru a explica acest lucru în continuare, faza staționară are ioni fixați, cum ar fi anioni sulfat sau cationi de amine cuaternare. Fiecare dintre acestea ar trebui să se asocieze cu un contraion (un ion cu sarcină opusă) dacă vrem să menținem neutralitatea acestui sistem. Dacă contraionul este un cation, atunci denumim sistemul ca rășină schimbătoare de cationi. Dar, dacă contraionul este un anion, sistemul este o rășină schimbătoare de anioni. În plus, există cinci etape majore în cromatografia cu schimb de ioni:
- Etapa inițială
- Adsorbția țintei
- Începutul eluției
- Sfârșitul eluției
- Regenerare
Ce este cromatografia de excludere a mărimii?
Cromatografia de excludere prin mărime sau SEC este o tehnică analitică în care moleculele dintr-un amestec pot fi separate după dimensiunea și greutatea moleculei. De obicei, funcționează cu molecule mari numite macromolecule. De obicei, pentru analiză se utilizează o soluție apoasă. Apoi se numește cromatografia de filtrare pe gel. Când este un solvent organic, se numește cromatografie de permeație pe gel.
Cromatografia de filtrare pe gel este o formă de cromatografia de excludere a mărimii în care folosim o soluție apoasă ca fază mobilă. Prin urmare, faza mobilă pe care o folosim adesea în această tehnică este un tampon apos. De asemenea, folosim o coloană cromatografică pentru această separare și trebuie să împachetăm coloana cu margele poroase. De obicei, Sephadex și agaroza sunt utile ca material poros. Prin urmare, aceste materiale sunt faza staționară a experimentului nostru. Mai mult, putem folosi dimensiunea porilor acestor margele pentru a determina dimensiunea macromoleculelor pe care le separăm. Cu toate acestea, este doar o estimare.
Figura 02: Un aparat pentru cromatografia de excludere a mărimii
Cromatografia cu permeație în gel este o formă de cromatografia de excludere a mărimii în care folosim un solvent organic ca fază mobilă. Prin urmare, putem folosi soluții precum hexan și toluen în acest scop. Faza staționară este un material poros, la fel ca în cromatografia de filtrare pe gel. Această tehnică este adesea aplicată polimerilor și altor materiale organic-solubile. Metoda de acțiune a tehnicii este similară cu cea a cromatografiei cu filtrare pe gel.
Care este diferența dintre schimbul de ioni și cromatografia de excludere a mărimii?
Cromatografia este o tehnică analitică care poate fi utilizată pentru a analiza diferite amestecuri. Diferența cheie dintre cromatografia de schimb ionic și cromatografia de excludere a mărimii este aceea că cromatografia de schimb de ioni este utilizată pentru a analiza substanțele ionice în funcție de sarcină, în timp ce cromatografia de excludere a mărimii este utilizată pentru a analiza molecule mari în funcție de dimensiune.
Infograficul de mai jos oferă mai multe informații despre diferența dintre schimbul de ioni și cromatografia de excludere a mărimii.
Rezumat – Schimb de ioni vs cromatografia de excludere a mărimii
Cromatografia este o tehnică analitică care poate fi utilizată pentru a analiza diferite amestecuri. Diferența cheie dintre cromatografia de schimb ionic și cromatografia de excludere a mărimii este aceea că cromatografia de schimb de ioni este utilizată pentru a analiza substanțele ionice în funcție de sarcină, în timp ce cromatografia de excludere a mărimii este utilizată pentru a analiza molecule mari în funcție de dimensiune.
