Diferența cheie dintre spectroscopia UV-vis și cea de fluorescență este că spectroscopia UV-vizibil măsoară absorbția luminii în domeniul UV-vizibil, în timp ce spectroscopia de fluorescență măsoară lumina emisă de o probă în intervalul de fluorescență după absorbția luminii la energie mai mare decât nivelul de energie emis.
Spectroscopia este o tehnică de măsurare a absorbției și emisiei de lumină și alte radiații de către materie.
Ce este spectroscopia UV Vis?
Spectroscopia vizibilă UV este o tehnică analitică care utilizează absorbția sau reflectanța unei părți din domeniul UV și completează regiunile vizibile adiacente ale spectrului electromagnetic. Această tehnică vine în două tipuri; sunt spectroscopie de absorbție și spectroscopie de reflexie. Utilizează lumina în intervalele vizibile și adiacente.
În general, absorbția sau reflectanța intervalului vizibil de lumină poate afecta în mod direct culoarea percepută a substanțelor chimice implicate în proces. În acest interval al spectrului, putem observa că atomii și moleculele pot suferi tranziții electronice. Aici, spectroscopia de absorbție este complementară spectroscopia de fluorescență, unde fluorescența se ocupă de tranzițiile electronilor de la starea excitată la starea fundamentală. În plus, absorbția măsoară tranzițiile de la starea fundamentală la starea excitată.
Figura 01: Spectroscopie UV Vizibil
Această tehnică spectroscopică este utilă în analiza cantitativă a diferitelor probe, cum ar fi ionii metalelor de tranziție, compușii organici foarte conjugați și macromoleculele din sistemele biologice. În general, analiza spectroscopică se realizează folosind soluții, dar putem folosi și solide și gaze.
Ce este spectroscopia de fluorescență?
Spectroscopia de fluorescență este un tip de spectroscopie electromagnetică care este utilă în analiza fluorescenței dintr-o probă. Această tehnică implică utilizarea unui fascicul de lumină (cum ar fi UV) pentru a excita electroni în moleculele unor compuși și îi poate determina să emită lumină. De obicei, această emisie este lumină vizibilă, dar nu neapărat aceeași.
Figura 02: Spectroscopie de fluorescență
De obicei, moleculele au stări diferite care sunt cunoscute sub numele de niveluri de energie. Această tehnică se preocupă în primul rând de stările electronice și vibraționale. Adesea, proba de analit are molecule într-o stare electronică fundamentală și o stare excitată de energie mai mare. Aceste două stări electronice au diferite stări de vibrație între ele. În timpul procesului de fluorescență, speciile chimice sunt excitate prin absorbția de fotoni și trec de la o stare fundamentală la un nivel de energie mai în alt. Ulterior, ciocnirile dintre alte molecule fac ca moleculele excitate să piardă energie vibrațională până când ajunge la o stare de vibrație scăzută din această stare excitată. Aceasta emite fotoni cu energii diferite și frecvențe diferite. Aceasta se numește fluorescență. Putem analiza aceste frecvențe diferite emise în acest mod pentru a determina diferitele niveluri de vibrație.
Care este diferența dintre spectroscopia UV Vis și fluorescență?
Tehnicile spectroscopice sunt utile în studierea proprietăților diferitelor substanțe chimice. Diferența cheie dintre spectroscopia UV-vis și cea de fluorescență este că spectroscopia UV-vizibil măsoară absorbția luminii în domeniul UV-vizibil, în timp ce spectroscopia de fluorescență măsoară lumina emisă de o probă în domeniul de fluorescență după absorbția luminii la o energie mai mare decât cea emisă. nivel de energie. În plus, spectroscopia cu fluorescență este mai sensibilă decât spectroscopia UV-vizibilă.
Infograficul de mai jos prezintă diferențele dintre spectroscopia UV și fluorescență sub formă tabelară pentru comparație una lângă alta.
Rezumat – UV Vis vs spectroscopie de fluorescență
Spectroscopia este o tehnică analitică importantă. Există diferite tipuri de spectroscopii, cum ar fi spectroscopie IR, spectroscopie UV vizibilă, spectroscopie cu fluorescență etc. Diferența cheie între spectroscopie UV-vis și fluorescență este că spectroscopia UV-vizibil măsoară absorbția luminii în intervalul UV-vizibil, în timp ce fluorescența spectroscopia măsoară lumina emisă de o probă în intervalul de fluorescență după absorbția luminii la o energie mai mare decât nivelul de energie emis.
