Diferența cheie – RPMI vs DMEM
Majoritatea studiilor de cercetare implică cultivarea celulelor animale și, prin urmare, aceste studii necesită menținerea liniilor de celule animale în condiții speciale de creștere. Cultivarea celulelor animale este realizată pe scară largă în studiile farmacologice pentru a identifica metabolismul medicamentelor, în diagnosticarea bolilor și în cercetarea cancerului. Mediul de cultură celulară este un aspect important al culturii de celule animale. Mediul Dulbecco Modificat Eagle (DMEM) și Mediul Roswell Park Memorial Institute (RPMI) sunt două medii de cultură utilizate în cultivarea celulelor animale. RPMI este un mediu utilizat pe scară largă pentru a cultiva celule de mamifere în cultură în suspensie. DMEM este un tip modificat de mediu bazal, cu concentrații crescute de aminoacizi și vitamine de până la patru ori. DMEM este utilizat în cultivarea celulelor în culturi aderente. Diferența cheie dintre cele două medii este tipul de cultură al mass-media. RPMI este utilizat pe culturi în suspensie, în timp ce DMEM este folosit pentru a cultiva celule aderente.
Ce este RPMI?
RPMI sau Roswell Park Memorial Institute Medium este denumit și RPMI 1640. Numele mass-media a fost derivat de institutul în care media a fost descoperită. Acest mediu este utilizat în mod obișnuit în cultura de celule animale, în special pentru creșterea celulelor de mamifere. Au fost dezvoltate inițial pentru a crește limfocite umane.
Următoarele ingrediente sunt incluse în RPMI.
- Glucoză
- indicator de pH (roșu fenol)\
- Săruri (clorură de sodiu, bicarbonat de sodiu, fosfat disodic, clorură de potasiu, sulfat de magneziu și azotat de calciu)
- Aminoacizi
- Vitamine (i-inozitol, clorură de colină, acid para-aminobenzoic, acid folic, nicotinamidă, clorhidrat de piridoxină, clorhidrat de tiamină, pantotenat de calciu, biotină și riboflavină, cianocobalamină)
Caracteristica specială a RPMI este concentrația crescută de fosfat în mediu. RPMI este utilizat într-o atmosferă de 5% dioxid de carbon. Acest lucru va oferi condiții maxime și optime pentru creșterea celulelor. pH-ul mediului este menținut la 8,0 prin sistemul de tamponare cu bicarbonat.
Figura 01: Cultură celulară pe o placă Petri
Aplicații ale RPMI în cultura celulară
- Cultivarea limfocitelor T și B umane, a celulelor măduvei osoase și a hibridomului.
- Folosit pentru a studia celulele neoplazice umane.
Ce este DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) este un mediu modificat care este preparat comercial. Textura originală a pudrei medii este galbenă. În DMEM, concentrația de vitamine este crescută de până la patru ori, crescând astfel conținutul de nutrienți din mediu.
DMEM este, de asemenea, modificat prin adăugarea mai multor săruri, cum ar fi nitratul feric, piruvatul de sodiu și unii aminoacizi neesențiali, cum ar fi serina și glicina. Formularea glucozei în medii este, de asemenea, modificată. Formularea originală este compusă din 1000 mg/L de glucoză, în timp ce în DMEM, concentrația este crescută până la 4500 mg/L. DMEM necesită, de asemenea, suplimentarea unui mediu seric, deoarece nu este un mediu complet. Cel mai adesea, DMEM este suplimentat cu ser fetal bovin (FBS). FBS furnizează proteinele și factorii de creștere necesari pentru procesul de cultură.
pH-ul mediului variază la adăugarea de bicarbonat de sodiu. pH-ul mediului înainte de adăugarea bicarbonatului de sodiu este în jur de 6,80 – 7,40, în timp ce pH-ul după adăugarea bicarbonatului de sodiu se află în intervalul 7,60 – 8,20. Temperatura de depozitare a mediului este de 2 – 8 0C.
Figura 02: DMEM
Aplicații ale DMEM
- Pentru a studia capacitatea de formare a plăcii a poliomavirusului în celulele embrionare de șoarece.
- În studiile de inhibiție a contactului.
- În cercetare și analiză culturi de celule de pui.
Care sunt asemănările dintre RPMI și DMEM?
- Atât RPMI, cât și DMEM sunt utilizate în cultura de celule animale.
- Atât mediile RPMI, cât și DMEM sunt formulări lichide.
- Atât mediile RPMI, cât și DMEM conțin aminoacizii esențiali, vitaminele și sărurile anorganice necesare creșterii.
- Atât mediile RPMI, cât și DMEM sunt incomplete. Prin urmare, trebuie adăugat ser.
- Atât mediile RPMI, cât și DMEM folosesc glucoza ca sursă de carbon.
- Atât mediile RPMI, cât și DMEM au un pH mai mare.
Care este diferența dintre RPMI și DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI este un mediu utilizat pe scară largă pentru a cultiva celule de mamifere într-o cultură în suspensie. | DMEM este un tip modificat de mediu bazal cu concentrații crescute de aminoacizi și vitamine. |
| Prezența de fosfați suplimentari | |
| Prezentă în RPMI. | absent în DMEM. |
| Utilizați | |
|
Folosit pentru a cultiva celule în culturi aderente. Este folosit pentru,
|
| Tipuri de cultură | |
| RPMI este folosit pentru culturile în suspensie. | DMEM este utilizat pentru culturile cu celule aderate. |
Rezumat – RPMI vs DMEM
Atât RPMI, cât și DMEM sunt utilizate pe scară largă în cultivarea celulelor animale, în special pentru a cultiva linii de celule animale, inclusiv limfocite in vitro. DMEM este un mediu bazal modificat în care există o concentrație crescută de nutrienți. RPMI dezvoltat de Roswell Park Memorial Institute și este, de asemenea, un mediu utilizat în cultivarea celulelor animale în special pentru limfocite de mamifere. Ambele medii sunt disponibile comercial. Aceasta este diferența dintre RPMI și DMEM.
