Diferența cheie – Vectorii YAC vs BAC
Vectorii sunt folosiți în clonarea moleculară. Un vector poate fi definit ca o moleculă de ADN care se comportă ca un vehicul pentru a transporta material genetic străin într-o altă celulă. Un vector care conține ADN străin este cunoscut ca ADN recombinant și ar trebui să aibă capacitatea de a-l replica și de a-l exprima în organismul gazdă. Cromozomul artificial de drojdie (YAC) și cromozomul artificial bacterian (BAC) sunt două tipuri de vectori implicați în clonare. Diferența cheie dintre YAC și BAC este că YAC este un sistem vectorial construit artificial care utilizează o regiune specifică a cromozomului de drojdie pentru a introduce segmente mari de materiale genetice în celulele de drojdie, în timp ce BAC este un sistem vectorial construit artificial folosind o regiune specifică de E.coli pentru a introduce segmente mari de ADN în celulele E. coli.
Ce sunt vectorii YAC?
YAC (cromozom artificial de drojdie) este un cromozom construit artificial care are capacitatea de a transporta un segment mare de ADN străin și de a se replica în celulele de drojdie. Are un centromer, telomeri, precum și secvențe de replicare autonomă care sunt esențiale pentru replicare și stabilitate. YAC ar trebui să poarte, de asemenea, un marker sau markeri selectivi și locuri de restricție pentru a-l face un vector de clonare eficient. O secvență mare de la 1000 kb la 2000 kb poate fi inserată în YAC și transferată în drojdie. Eficiența de transformare a YAC este foarte scăzută.
Figura 01: Vector YAC
Ce sunt vectorii BAC?
Cromozomul artificial bacterian (BAC) este un cromozom construit artificial pentru clonarea moleculară. Are regiuni specifice ale plasmidei E. coli F și este circulară și super înfăşurată. BAC este dezvoltat pentru a clona fragmente de ADN la bacterii, în special la E. coli. Poate purta fragmente de ADN cu dimensiuni de până la 300 kb. În comparație cu YAC, inserțiile de clonare BAC au dimensiuni mai mici. BAC-urile au fost dezvoltate în 1992 și sunt încă populare datorită stabilității și ușurinței de construcție. BAC-urile sunt utile și în dezvoltarea vaccinurilor.
Figura 02: Vectorul BAC în clonarea moleculară
Care este diferența dintre vectorii YAC și BAC?
YAC vs vectori BAC |
|
| YAC este un cromozom modificat genetic cu utilizarea ADN-ului de drojdie în scopul clonării. | BAC este o moleculă de ADN modificată genetic care utilizează ADN de E. coli în scopul clonării. |
| Sex | |
| YAC-urile au fost concepute pentru a clona fragmente mari de ADN genomic în drojdie. | BAC au fost dezvoltate pentru clonarea fragmentelor genomice mari în Escherichia coli. |
| Lungime de inserare | |
| YAC-urile pot conține inserții genomice de dimensiunea megabazei.(1000 kb – 2000 kb). | BAC-urile pot conține inserții de 200–300 kb sau mai puțin. |
| Constructii | |
| YAC ADN-ul este greu de purificat intact și necesită o concentrație mare pentru a genera sistemul vectorial YAC. | BAC este ușor de purificat intact și poate fi construit cu ușurință. |
| Himerism | |
| YAC-urile sunt adesea himerice. | BAC-urile sunt rareori himerice. |
| Stabilitate | |
| YAC este instabil. | BAC este stabil. |
| Modificări | |
| Recombinarea drojdiei este foarte fezabilă și rămâne întotdeauna activă. Prin urmare, poate genera ștergeri și alte rearanjamente într-un YAC. | E. coli este prevenită și este activată atunci când este necesar. Prin urmare, reduce rearanjamentele nedorite în BAC. |
| Întreținere | |
| Manipularea YAC-urilor recombinate necesită de obicei transferul YAC în E. coli pentru manipulare ulterioară. Prin urmare, este un proces laborios. | Modificarea BAC apare direct în E. coli. Deci nu este nevoie de transfer de ADN. Prin urmare, procesul nu este laborios. |
Rezumat – Vectori YAC vs BAC
YAC a devenit un instrument de cercetare esențial în procesele de clonare datorită capacității sale de a clona fragmente mari de ADN în organismul gazdă. Cu toate acestea, YAC-urile au mai multe dezavantaje ca vectori, cum ar fi dificultăți de construcție, himerism, instabilitate etc. Prin urmare, pentru a depăși aceste probleme, oamenii de știință au dezvoltat vectori BAC. BAC a fost construit folosind regiuni specifice ale cromozomului E. coli. Este un vector stabil și poate fi construit cu ușurință. Cu toate acestea, lungimea ADN-ului pe care o poate gestiona BAC este de până la 20 de ori mai mică decât cea a YAC. Aceasta este diferența dintre sistemele vectoriale YAC și BAC. În zilele noastre, BAC este mai preferat în comparație cu YAC în laboratoare.
