Diferența cheie dintre vectorii de inserție și de înlocuire este că vectorul de inserție are capacitatea de a introduce lungimi moderate de ADN străin, în timp ce vectorul de înlocuire are capacitatea de a acomoda lungimi mai mari de ADN străin.
Vectorii fagi sunt bacteriofagii utilizați pentru clonare. Există două tipuri de vectori fagi; sunt vector de inserție și vector de înlocuire. De asemenea, toți vectorii fagi constau din gene neesențiale. Cu toate acestea, aceste gene trebuie eliminate din fagi pentru a facilita noi inserții de ADN străin.
Ce este un vector de inserare?
În primul rând, vectorul de inserție este cea mai simplă formă de vectori de clonare lambda. De fapt, este un tip de vector fagic care are un situs de restricție unic introdus în genomul vectorului la poziția ADN-ului opțional. În plus, ADN-ul fagului rămâne fără îndepărtare. Această neîndepărtare a ADN-ului fag reduce dimensiunea inserțiilor (ADN străin) care urmează să fie donate în vector. Mai mult, acești vectori sunt utili în donarea și exprimarea cADN-ului. GT10, GT11 și Zap sunt exemple ale acestui vector.
Figura 01: fagul Lambda
Vectorul de inserare constă dintr-un singur site de recunoaștere. Funcția principală a acestui vector este de a dezvolta biblioteci de ADNc derivate din secvențe de ARNm eucariote. Mai mult decât atât, poate găzdui doar lungimi de ADN străin care variază între 05-11 kb. De asemenea, posedă un loc unic de clivaj pentru inserarea ADN-ului străin.
Ce sunt vectorii de înlocuire?
Vectorul de înlocuire sau vectorul de substituție este un tip de vector fagic dezvoltat din îndepărtarea unei regiuni medii „fragment de umplere” a ADN-ului fag. Inserția ADN străină dorită înlocuiește ADN-ul fag.
Figura 02: Vector de înlocuire
Vectorii de înlocuire sunt importanți în crearea bibliotecilor genomice precum EMBL4 și Charon40. Acești vectori pot găzdui o lungime mai mare de ADN străin, variind între lungimi de 08-24 kb. Regiunea de umplere constă, de asemenea, dintr-o genă care face ca vectorul fag să nu fie viabil în interiorul unei gazde bacteriene.
Care sunt asemănările dintre vectorii de inserare și de înlocuire?
- Vectorii de inserare și înlocuire sunt vectori fagi.
- Ambele vectori găzduiesc inserții de ADN străin.
- Amândoi sunt de ajutor în crearea bibliotecilor ADN.
Care este diferența dintre vectorii de inserare și de înlocuire?
Inserare vs vectori de înlocuire |
|
| Vectorul de inserție este un tip de vector fagic care are un loc de restricție introdus în genomul fagului la locul ADN-ului opțional. | Vectorul de înlocuire este un tip de vector fagic dezvoltat din îndepărtarea unei regiuni mijlocii „fragment de umplere” a ADN-ului fag |
| Mărimea fragmentelor de inserare | |
| 05-11 kb lungime | 08-24 kb lungime |
| Fragment de umplere | |
| Fără fragment de umplere | Fragmentul de umplere este înlocuit cu o inserție străină |
| Funcție | |
| Important pentru a crea biblioteci ADNc | Important în crearea bibliotecilor de genom |
| Exemple | |
| GT10, GT11 și Zap sunt exemple | EMBL4 și Charon40 sunt exemple |
| Cleavage Site | |
| Este prezent un site unic de clivaj | Situul de clivaj conține gene care nu sunt esențiale pentru ciclul litic |
Rezumat – Vectori de inserare vs de înlocuire
Atât vectorii de inserție, cât și de înlocuire sunt două tipuri de vectori fagi. Ambii vectori au situsuri de restricție care facilitează acomodarea noilor inserții străine de ADN. Vectorii de inserție sunt importanți în crearea bibliotecilor de ADNc, în timp ce vectorii de înlocuire sunt importanți în crearea bibliotecilor genomice. În plus, vectorii de inserție găzduiesc inserții de ADN cu o lungime moderată. Dar vectorii de înlocuire pot găzdui lungimi mai mari de inserții de ADN străin. În general, aceasta este diferența cheie dintre vectorii de inserare și de înlocuire.
