Diferența cheie dintre eluția izocratică și cea cu gradient este că eluția izocratică se referă la menținerea unei concentrații constante în faza mobilă, în timp ce eluția cu gradient se referă la menținerea unei concentrații variabile în faza mobilă.
Termenii eluare izocratică și gradient sunt utilizați în cromatografie. În timpul unui ciclu cromatografic, folosim o fază staționară, care este o substanță nemișcată, împreună cu o fază mobilă, substanța în mișcare. Eluția izocratică și gradient descrie proprietățile fazei mobile.
Ce este eluția izocratică?
Eluția izocratică este un termen folosit în cromatografie atunci când faza mobilă are o concentrație constantă. Aici, concentrația fazei mobile este constantă pe tot parcursul procesului cromatografic. În acest proces, putem observa că lățimea vârfului crește liniar cu timpul de retenție în cromatogramă. Totuși, acest lucru duce la un dezavantaj - vârfurile cu eluție târzie pentru eluția târzie devin foarte plate și largi. Prin urmare, aceste vârfuri largi devin greu de recunoscut ca vârfuri.
Mai mult, în eluția izocratică, selectivitatea nu se modifică în funcție de dimensiunile coloanei. Aceasta înseamnă că selectivitatea nu depinde de modificările dimensiunilor coloanei. Aici, lungimea și diametrul sunt considerate dimensiuni ale coloanei. Prin urmare, vârfurile eluează în aceeași ordine.
Ce este eluția cu gradient?
Eluția cu gradient este un termen folosit în cromatografie atunci când aici faza mobilă are o concentrație diferită. Cu alte cuvinte, concentrația fazei mobile nu trebuie să rămână constantă. De exemplu, în HPLC, o metodă obișnuită de separare folosește metanol 10% inițial și se termină la 90%, prin creșterea treptată a concentrației. Faza mobilă are două componente: un solvent slab și un solvent puternic. Solventul slab permite solutului să elueze lent, în timp ce solventul puternic provoacă eluarea rapidă a solutului. În cromatografia în fază inversă, folosim apă ca solvent slab și solvent organic ca solvent puternic.
Figura 01: HPLC
În plus, metoda de eluare cu gradient scade componentele de eluare ulterioare pentru a le face să elueze mai rapid, dând un vârf îngust în cromatogramă. Această metodă îmbunătățește forma și înălțimea vârfului, de asemenea. În plus, în tehnica de eluare cu gradient, ordinea de eluție se modifică odată cu modificările dimensiunilor coloanei.
Care este diferența dintre eluția izocratică și gradient?
Termenii eluare izocratică și gradient sunt utilizați în cromatografie. Eluția izocratică și gradient descriu proprietățile fazei mobile. Diferența cheie dintre eluția izocratică și cea cu gradient este că eluția izocratică se referă la menținerea unei concentrații constante în faza mobilă, în timp ce eluția cu gradient se referă la menținerea unei concentrații variabile în faza mobilă.
În tehnica de eluare izocratică, lățimea vârfului crește liniar cu timpul de retenție. Cu toate acestea, în tehnica de eluare în gradient, retenția componentelor care se eluează mai târziu este scăzută, astfel încât eluția devine mai rapidă și dă vârfuri înguste. În afară de aceasta, în eluția izocratică, selectivitatea nu depinde de dimensiunile coloanei, dar în eluția cu gradient, selectivitatea se modifică odată cu schimbarea dimensiunilor coloanei.
Următorul tabel rezumă diferența dintre eluția izocratică și gradient.
Rezumat – Eluție izocratică vs gradient
Eluția izocratică și eluția cu gradient descriu proprietățile fazei mobile. Diferența cheie dintre eluția izocratică și cea cu gradient este că eluția izocratică se referă la menținerea unei concentrații constante în faza mobilă, în timp ce eluția cu gradient se referă la menținerea unei concentrații variabile în faza mobilă.
