Diferența cheie – Transformanți vs recombinanți
Recombinarea și transformarea sunt doi pași cruciali în inginerie genetică, în care caracteristicile unui organism sunt modificate în mod deliberat prin manipularea materialului său genetic. Recombinarea este un proces în care ADN-ul străin este încorporat într-un genom vector și se formează molecula de ADN recombinat. Transformarea este următoarea etapă în care molecula recombinată este introdusă în organismul gazdă. Celula gazdă sau organismul facilitează exprimarea moleculei recombinante. Diferența cheie dintre transformanți și recombinanți este că transformanții sunt celulele sau organismele care preiau molecule recombinate în interior și facilitează exprimarea, în timp ce recombinanții sunt vectorii care permit inserarea ADN-ului străin în genomul său și transportul în transformanții gazdă pentru exprimare.
Ce sunt transformanții?
Transformanții sunt celulele sau organismele în care ADN-ul recombinat este preluat pentru exprimare. Bacteriile sunt utilizate în mod obișnuit ca organisme gazdă în inginerie genetică, deoarece sunt ușor de crescut, multiplicat și manipulat în condiții de laborator, iar procesul de transformare este ușor în comparație cu alte organisme. Cea mai populară bacterie gazdă folosită în inginerie genetică este bacteria E coli.
În timpul procesului de transformare, celulele gazdă sunt induse să preia recombinanții. Cu toate acestea, unele celule gazdă nu preiau molecule recombinante. Sunt cunoscuți ca netransformanți, iar celulele care conțin molecule de ADN recombinant în interior sunt cunoscute ca transformanți. Selecția transformanților din netransformanți se face folosind markeri selectabili în biologia moleculară. Markerii selectabili sunt inserați în genomul vector împreună cu insertul de ADN. Markerii selectabili utilizați în mod obișnuit sunt genele rezistente la antibiotice. Genele marker facilitează diferențierea transformanților și continuă procesul. După procesul de transformare, bacteria este crescută într-un mediu care conține antibiotice. Doar transformanții sunt capabili să crească pe acel mediu, deoarece posedă recombinanții în interior.
Odată ce molecula de ADN recombinat este transformată în organismul gazdă, ADN-ul străin poate fi fie integrat în genomul celulei gazdă, fie rămâne neintegrat în citoplasmă. Cu toate acestea, expresia și replicarea ADN-ului străin apar în organismul gazdă și produc rezultatul dorit din proces.
Ce sunt recombinantele?
Un recombinant este un organism sau o celulă care posedă un genom recombinat care conține ADN străin. Recombinanții sunt rezultatul procesului de inginerie genetică. Ele sunt construite artificial in vitro prin inserarea genelor de interes și modificarea genomului. Adesea, plasmidele bacteriene și bacteriofagii acționează ca recombinanți în inginerie genetică. Are himeră de ADN-uri diferite. Molecula de ADN recombinat transportă ADN străin către organismul gazdă și îl face să exprime și să formeze produsul dorit.
Moleculele recombinante sunt construite folosind endonucleaze de restricție și ADN ligaze. Fragmentul de ADN dorit este separat de organismul original și inserat în vector pentru a face recombinantul pentru transformare. Tăierea genei de interes și deschiderea organismului vector ar trebui să se facă folosind aceeași enzimă de restricție pentru a crea capete lipicioase compatibile pentru a le uni. Odată ce ADN-ul străin este încorporat în genomul vectorului, acesta este cunoscut ca moleculă de ADN recombinant sau recombinat.
Figura 02: ADN recombinant
Care este diferența dintre transformanți și recombinanți?
Transformante vs recombinante |
|
| Transformanții sunt celulele care au în interior molecule de ADN recombinat. | Recombinanții sunt molecule purtătoare care au ADN străin inserat în propriul genom. |
| Expresia ADN-ului străin | |
| Sunt celulele gazdă care sunt capabile să exprime ADN-ul recombinant. | Ar trebui să se poată auto-replica în organismul gazdă. |
| Selectare | |
| Celulele care pot fi crescute și multiplicate cu ușurință sunt selectate ca celule gazdă. | Acestea trebuie să poată fi extrase cu ușurință și ar trebui să conțină marcatori selectabili. |
Rezumat – Transformanți vs recombinante
Transformanții sunt celulele sau organismele cu molecule de ADN recombinant în interiorul lor. Recombinanții sunt organismele sau celulele care au suferit recombinare genetică și au ADN străin în genomul lor. Celulele bacteriene sunt adesea folosite ca celule gazdă pentru transformare, iar plasmidele și bacteriofagii sunt adesea folosiți ca vectori în tehnologia ADN recombinant. Aceasta este diferența dintre transformanți și recombinanți.
