Diferența cheie dintre testul BCA și Bradford este că testul BCA necesită timp și mai puțin precis, în timp ce testul Bradford este rapid și precis.
Testul BCA și Bradford sunt două metode de testare pentru determinarea concentrației proteinelor. Aceste două teste au principii diferite de analiză și diferențe în ceea ce privește precizia lor.
Ce este testul BCA?
Testul BCA sau testul acidului bicinconinic este un test biochimic util în determinarea concentrației totale de proteine într-o soluție. Această metodă este, de asemenea, numită test Smith după inventatorul ei, Paul K. Smith. Această metodă analitică prezintă asemănări cu testul proteinei Lowry, testul proteinei Bradford sau reactivul biuret. Putem observa concentrația totală de proteine într-o probă dată printr-o schimbare de culoare a soluției de probă, care trece de la verde la violet. Această schimbare de culoare are loc proporțional cu conținutul de proteine. După aceea, putem folosi o tehnică colorimetrică pentru a analiza intensitatea culorii și conținutul de proteine din probă.
Metoda BCA de estimare a proteinelor
Când luați în considerare mecanismul testului BCA, soluția tipică de BCA conține o soluție foarte alcalină cu un pH de aproape 11,25, iar ingredientele din această soluție includ acid bicinchoninic, carbonat de sodiu, bicarbonat de sodiu, tartrat de sodiu și sulfat de cupru (II) pentahidrat. Acest test depinde în primul rând de două reacții chimice: reducerea cuprului (II) la cupru (I) prin legăturile peptidice din proteine și chelarea a două molecule de acid bicinchoninic cu ion de cupru (I), rezultând un complex de culoare violet care poate absorb lumina la o lungime de undă de 562 nm. În prima reacție, cantitatea de cupru (II) redusă de legăturile peptidice este proporțională cu cantitatea de proteină din probă.
Ce este testul Bradford?
Testul Bradford este o metodă analitică spectroscopică utilă în măsurarea concentrației de proteine într-o soluție. Această metodă a fost dezvoltată de Marion M. Bradford în 1976 și este o metodă relativ rapidă și precisă.
Reacția de culoare a proteinei și a reactivului Bradford
Putem folosi această metodă pentru a determina concentrația cantității de proteine dintr-o probă. Reacția chimică care are loc în probă în timpul acestui test depinde exclusiv de compoziția de aminoacizi a proteinei din probă.
Metoda Bradford de estimare a proteinelor
Când luăm în considerare metoda acestui test, este un test colorimetric al proteinei care se bazează pe schimbarea absorbanței colorantului numit Coomassie Brilliant Blue G-250. În general, acest colorant există în trei forme ca formă anionic (albastru), formă neutră (verde) și formă cationică (roșie). Prin urmare, în condiții acide, colorantul își schimbă culoarea de la roșu la albastru. Acest lucru se datorează legăturii proteinei cu colorantul. În schimb, dacă nu există proteine care să se lege cu colorantul, schimbarea culorii nu apare, soluția capătă o culoare roșu-maro. Acest colorant este capabil să formeze un complex puternic, necovalent cu grupa carboxil a proteinei prin forțele Van der Waal și atracțiile electrostatice.
Care este diferența dintre testul BCA și Bradford?
Testul BCA și Bradford sunt două metode de testare pentru determinarea concentrației proteinelor. Aceste două teste au principii diferite de analiză și diferențe în precizia lor. Diferența cheie dintre testul BCA și Bradford este că testul BCA necesită timp și mai puțin precis, în timp ce testul Bradford este rapid și precis.
Următorul infografic rezumă diferențele dintre testul BCA și Bradford sub formă tabelară.
Rezumat – BCA vs Bradford Assay
Testul BCA sau testul acidului bicinconinic este un test biochimic util în determinarea concentrației totale de proteine într-o soluție. Testul Bradford este o metodă analitică spectroscopică utilă în măsurarea concentrației de proteine în soluție. Diferența cheie dintre testul BCA și Bradford este că BCA necesită timp și mai puțin precis, în timp ce testul Bradford este rapid și precis.
