Diferența cheie dintre imunoprecipitare și coimunoprecipitare este că imunoprecipitarea este o tehnică care precipită o proteină din soluție folosind un anticorp specific, în timp ce coimunoprecipitarea este o tehnică care precipită complexe proteice intacte din soluție folosind un anticorp specific.
Interacțiunea antigen-anticorp este o interacțiune chimică specifică între anticorpii produși de celulele B și antigene (proteine) în timpul unei reacții imune. În mod normal, antigenii solubili se combină cu anticorpi solubili în prezența unui electrolit la temperatură și pH solubile pentru a face un complex vizibil insolubil. Aceasta se numește reacție de precipitare. Prin urmare, imunoprecipitarea și coimunoprecipitarea sunt două tipuri de reacții de precipitare care sunt utilizate în mod obișnuit în laboratoare pentru a identifica proteine precum antigenele.
Ce este imunoprecipitația?
Imunoprecipitarea este o tehnică de precipitare a unei proteine dintr-o soluție folosind un anticorp specific. Uneori, această tehnică este cunoscută și sub numele de imunoprecipitare individuală a proteinelor. Imunoprecipitarea utilizează un anticorp pentru a izola o proteină selectată de interes din lizatul celular. Anticorpul își purifică proteina țintă sau antigenul specific dintr-un amestec. Anticorpul se leagă de proteină, iar complexul anticorp-antigen este scos din probă. În configurația experimentală, complexul antigen-anticorp este extras folosind agaroză cuplată proteină A/G sau margele magnetice. Ulterior, margelele sunt spălate, iar proteina de interes este eluată. Proteina sau antigenul purificat obținut prin imunoprecipitare este verificat printr-o varietate de tehnici, cum ar fi testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) și Western blot (WB).
Figura 01: Imunoprecipitații
În plus, proteinele sau antigenele izolate pot fi cuantificate și identificate prin spectrometrie de masă folosind modele de digestie enzimatică bazate pe secvența primară. Există anumite considerații înainte de a începe un experiment de imunoprecipitare: alegerea formatului metodei, legarea proteinelor și mărgelelor, alegerea anticorpului primar și a izotipului potrivit și control negativ.
Ce este coimunoprecipitația?
Coimunoprecipitarea este o tehnică de precipitare a complexelor proteice intacte din soluție folosind un anticorp specific. Coimunoprecipitarea funcționează în general prin selectarea unui anticorp specific care vizează o proteină cunoscută (antigen) despre care se crede că este membru al unui complex mai mare de proteine. Prin țintirea membrului cunoscut cu un anticorp specific, este posibilă extragerea întregului complex proteic din soluție. Acest lucru permite identificarea membrilor necunoscuți ai complexului. Conceptul de scoatere a complexelor proteice din soluție este uneori denumit mecanism de „tragere în jos”.
Figura 02: Coimunoprecipitația B
Coimunoprecipitarea este o tehnică puternică care este folosită pentru a analiza interacțiunile proteină-proteină. Scopul principal al coimunoprecipitării este identificarea partenerilor care interacționează, cum ar fi liganzi, cofactori sau molecule de semnalizare la proteina de interes. Mai mult, coimunoprecipitarea este o tehnică eficientă care este utilizată pentru a separa proteinele din ser, lizat de celule, țesut omogenizat sau mediu condiționat.
Care sunt asemănările dintre imunoprecipitație și coimunoprecipitație?
- Imunoprecipitarea și coimunoprecipitarea sunt două tipuri de tehnici bazate pe reacția de precipitare.
- Ambele tehnici pot fi utilizate pentru a identifica antigenul țintă printr-un anticorp specific.
- Ambele tehnici depind puternic de interacțiunea antigen-anticorp.
- Sunt utilizate în mod obișnuit în laboratoarele clinice.
Care este diferența dintre imunoprecipitație și coimunoprecipitație?
Imunoprecipitarea este o tehnică care precipită o proteină din soluție folosind un anticorp specific, în timp ce coimunoprecipitarea este o tehnică care precipită complexe proteice intacte din soluție folosind un anticorp specific. Astfel, aceasta este diferența cheie dintre imunoprecipitare și coimunoprecipitare. Mai mult, imunoprecipitarea este folosită mai frecvent în laboratoare, în timp ce coimunoprecipitarea nu este utilizată în mod obișnuit în laboratoare.
Infograficul de mai jos prezintă diferențele dintre imunoprecipitație și coimunoprecipitare în formă tabelară pentru comparare una lângă alta.
Rezumat – Imunoprecipitație vs Coimunoprecipitație
Imunoprecipitarea și coimunoprecipitarea sunt două tipuri de tehnici bazate pe reacția de precipitare care depind de interacțiunea antigen-anticorp. Tehnica de imunoprecipitare precipită o proteină din soluție folosind un anticorp specific, în timp ce tehnica de coimunoprecipitare precipită complexe proteice intacte din soluție folosind un anticorp specific. Deci, aceasta rezumă diferența dintre imunoprecipitare și coimunoprecipitare.
