Diferența cheie – Transfecție tranzitorie vs. stabilă
Transfecția este un proces care este implicat în transferul de gene al celulelor eucariote folosind metode chimice sau fizice. Transfecția poate fi clasificată în două tipuri principale, numite transfecție tranzitorie și transfecție stabilă. În timpul transfecției tranzitorii, gena de interes nu reușește să se integreze cu genomul gazdei și este exprimată temporal în interiorul gazdei pe termen scurt, în timp ce, în cazul transfecției stabile, gena de interes se integrează cu genomul gazdei și este susținută pe termen lung în mai multe generații.. Aceasta este diferența cheie dintre transfecția tranzitorie și cea stabilă. În ambele cazuri, transfecția are succes și genele sunt exprimate.
Ce este transfecția tranzitorie?
Transfecția este un instrument important pentru inserarea genelor în celulele eucariote. Printre cele două tipuri de transfecție, transfecția tranzitorie este o modalitate comună de transfer de gene. Printr-un vector, genele străine sunt transformate în interiorul celulelor gazdă. Odată ce ADN-ul străin intră în celula gazdă, are două opțiuni. Se poate integra fie cu genomul gazdei și se poate replica, fie rămâne în interior fără a se integra în genom. Transfecția tranzitorie prezintă expresia temporară a genelor inserate fără a se integra în genomul gazdei. Genele exprimă și produc proteina codificată până când celula se divide. Cu toate acestea, din cauza incapacității de integrare, nu se poate replica și nu poate intra în generațiile viitoare. Acest tip de transfecție are succes pentru o perioadă scurtă de timp. În timpul diviziunii celulare sau datorită altor factori, ADN-ul străin este supus degradării. Transfecția tranzitorie este prezentată atunci când ADN-ul străin este sub formă de ADN puternic încolăcit.
Figura 01: Transfecție tranzitorie
Ce este transfecția stabilă?
Transfecția stabilă arată integrarea de succes a genelor străine în genomul gazdei. Odată ce ADN-ul străin intră în interiorul celulei gazdă, o parte a ADN-ului străin se integrează cu genomul gazdă și devine o parte a acestuia. Prin urmare, ADN-ul străin se replic și trece în generațiile viitoare atunci când genomul gazdă se reproduce. Acest tip de transfecție este complex și rar. Cu toate acestea, datorită transfecției stabile în genom, această trăsătură este susținută pentru o perioadă mai lungă de câteva generații.
Transfecția stabilă este un proces dificil și necesită o livrare eficientă a ADN-ului și achiziția celulară a ADN-ului străin în genomul său. Prin urmare, ADN-ul liniar favorizează transfecția stabilă decât ADN-ul circular. Cu toate acestea, rata de transfecție stabilă este de aproximativ una din 104 celule transformate. Transfecția stabilă poate fi observată prin cotransformarea unui marker selectabil și efectuarea selecției artificiale pe un mediu.
Figura 02: Transfectare stabilă
Care este diferența dintre transfecția tranzitorie și cea stabilă?
Transfecție tranzitorie vs stabilă |
|
| ADN-ul străin nu se integrează într-un genom gazdă. | ADN-ul străin se integrează cu genomul gazdei și devine o parte a acestuia. |
| Replicare în gazdă | |
| Genele transfectate tranzitoriu nu se reproduc în gazdă. Prin urmare, genele nu sunt transmise generațiilor următoare. | Genele sunt replicate în gazdă și transmise generațiilor viitoare. |
| Durata de timp a expresiei genei | |
| Genele sunt exprimate pentru o perioadă de timp finită și, după aceea, sunt distruse. | Genele devin parte a genomului și sunt exprimate în cadrul generației pentru o perioadă lungă de timp. |
| Utilizați | |
| Acest lucru este util pentru a studia efectele exprimării pe termen scurt a genelor sau a produselor genetice. | Acest lucru este util pentru a studia efectele expresiilor genelor pe termen lung. |
| Detecția transfecției | |
| Genele sunt exprimate și pot fi detectate cu ușurință prin inserarea unei gene reporter. | Transfecția stabilă poate fi detectată cu ușurință inserând un marker selectabil și selectând prin selecție artificială pe medii. |
| Apariție și proces | |
| Transfecția tranzitorie este obișnuită și nu este complex de efectuat. | Transfecția stabilă este rară și complex de efectuat. |
| Natura ADN | |
| ADN-ul foarte supraînfăşurat este potrivit pentru transfecţia tranzitorie. | ADN-ul liniar este potrivit pentru transfecția stabilă. |
| Aplicații | |
| Acest lucru este folosit pentru studii de distrugere a genelor sau tăcere cu ARN inhibitori, producția de proteine la scară mică | Acest lucru este utilizat pentru producerea de proteine pe scară largă, studii de farmacologie pe termen lung, terapia genică, cercetarea asupra mecanismelor de reglare genetică pe termen lung |
Rezumat – Transfecție tranzitorie vs stabilă
Transfecțiile tranzitorii și stabile sunt două tipuri de transfecții prezentate în timpul transferului genei în celulele eucariote prin sisteme nevirale. ADN-ul străin transformat nu este integrat cu genomul gazdei în transfecția tranzitorie, în timp ce se integrează cu genomul gazdei în transfecția stabilă. ADN-ul circular încolăcit este prezentat transfecție tranzitorie, în timp ce ADN-ul liniar preferă transfecția stabilă. Aceasta este diferența dintre transfecția tranzitorie și cea stabilă. Cu toate acestea, transfecția tranzitorie este mai comună și mai ușoară în comparație cu transfecția stabilă. Dar selecția uneia dintre două depinde de scopul transferului de gene și de durata proiectului de cercetare.
